不同龋敏感儿童腔变异链球菌临床分离株不同基因型菌株有机酸及胞外多糖产生能力的实验研究.pdfVIP

不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离株不同基因型菌株 有机酸及胞外多糖产生能力的实验研究 摘 要 目的：乳牙龋是儿童口腔中的常见病和多发病。变异链球菌DNA并ll毒 力因子存在基因多态性，其致龋力的差异在一定程度上由其毒力因子的遗 传特性所决定。本研究在前期实验的基础上，对不同龋敏感儿童口腔变异 链球菌临床分离株不同基因型菌株有机酸及细胞外多糖产生能力是否存在 差异进行探讨，分析不同基因型菌株在致龋过程中是否发挥了不同的作用， 探索通过检NJL童口腔中变异链球菌的基因型来预NJL童龋敏感性的可能 性，为完善龋危险性预测方法提供有力的理论和实验依据。方法：1．以前 期实验获得的具有不同基因核型的高龋，龋失补指数(decayed，missing， filledteeth l株变异 链球菌中选取其中66株临床分离菌株(包括23种基因型)为实验菌株，于 轻唾琼脂(MS)平板复苏，涂片检查为纯培养后，取典型菌落接种于牛心 Heart 脑浸液(Brain 培养24h，配制相同浓度的菌悬液(A540nm=1．O)，分别接种10ml含 009l于1 产物，用气相色谱仪对实验样本进行测定，比较不同基因型实验菌株代谢 链球菌临床分离株菌悬液，按菌液与含l％蔗糖的BHI液体培养基l：10 (v／v)的比例接种细菌，37℃厌氧培养24h，离心，收集上清液，细菌沉 淀物用5ml蒸馏水洗涤、离心两次，三次上清液合并；水洗后的细菌加入 O．5mol／LNaOH5ml洗涤、离心三次，合并上清液。两部分上清液各取2mI， 分别加入三倍体积无水乙醇，4C冰箱放置过夜，离心，弃水相，沉淀分别 O．1mol／L 加入5ml蒸馏水及5ml NaOH溶液溶解，用葸酮法分别测定水溶性 及水不溶性葡聚糖含量。结果：1．高龋、中龋及无龋儿童携带不同基因型 数目的变异链球菌临床分离株有机酸代谢产物的产生能力存在差异，高龋 组中龋组无龋组，差异具有统计学意义(pO．05)。不同基因型菌株有 机酸产生能力也有差异，携带基因型数目越多的菌株其产酸能力越强。所 产生的有机酸，乳酸的量明显高于乙酸和甲酸。2．高龋、中龋组变异链球 菌临床分离株合成水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖能力无明显不同，但均 强于无龋组；不同基因型菌株合成水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖能力无 显著性差异(pO．05)。所有菌株合成水溶性葡聚糖的能力均高于水不溶 性葡聚糖。结论：1．携带不同基因型数目的变异链球菌临床分离株有机酸 代谢产物的量存在差异，基因型越多的菌株其产酸能力越强。乳酸是产生 最多的有机酸。2．不同基因型的变异链球菌临床分离株合成胞外多糖的能 力存在差异，但是个体菌株所携带的基因型数目与其合成胞外多糖能力的 差异没有统计学意义。所有菌株合成水溶性葡聚糖的能力均高于水不溶性 葡聚糖。 关键词：龋齿；乳牙；变异链球菌：基因型；有机酸；胞外多糖 the of acidand of organic production Analyzing from different mutansisolated genotypeStreptococcus caries childrenwithdifferent experience Abstract canbe isa