重组人肿瘤坏死子、全反式维甲酸诱导涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的实验研究.pdfVIP

重组人肿瘤坏死因子、全反式维甲酸诱导涎腺腺样囊性癌 细胞凋亡的实验研究 摘簧 细胞凋亡(apoptosis)是指纲腿在特定蛉信母分子感动下， 遵循自身的獠序而消亡的过程。细胞凋亡是细胞的生理饿死亡现 象，受到基霹的调控，井彰为多种刺激诱导产生。因此，通过诱 导肿瘸细胞凋亡来达到抑制、治疗肿瘤的目的已成为目前肿瘤防 治研究的又～突破q，弗以鼗为基础展开了各种窳验研究，但其 中涉及涎腺蟊中瘤细胞凋亡的研究尚不多见。涎腺肿瘤是口腔颌面 部第二大类黔癯，其，¨中隙样囊性癌恶性程度蕊，本后易笈发，严 重危及人类生命。l本实验分剐成厢全反式维甲酸(alt-trans retinoiC human acid，ATRA)、重组人肿瘸坏死因子(recombined tumornecrosiS factor-U，rhTNF-n)予体外诱殍入涎腺腺样囊 adenoid carcinoma。SACC)凋亡， 性癌纲魁(sal{varycystic 旨在为抑制舯瘤的嫩长及复发提供理论依据，为涎腺腺样囊住雅 的临床治疗掇供荻惑路。 1、rhTNF-n诱鼯SACC细胞凋亡的实验研究 枣毒料和方法：(1)实验末孝料：涎腺腺样囊性癌细胞株。(2)实验 方法：SACC细胞子RPWll640培养波(含10％新生牛血清)中，37 ℃恒溺孵育。实验分四组：A组(1500U／mlrhTNF一8处理24h)、B 组(1500U／m]rhTNF-a处理48h)、C组(1500U／mlrhTNF-o处理 72h)、D缎(3000U向l rh州卜d娥理72h)。器相应对照缀分别热 入生理盐水作为溶荆对照，焉分别计数各级细胞数目，弗应用流 式绷胞术检溅各组攒亡率及细胞瘸期的分农愤提，另鳢取药物处 理后的sAcc细胞制作光镜、电镜标本进行形态学观察。 结果：(1)A组细腿总数必197。∞±13．58X104个，其瓣照维隽 272．33±17．65X 10‘个(PO．05)：B组细胞总数为308．00±J6．65 总数为453．00±11．02×10‘个，其对照组为630．33±9．56×10‘个 (PO．01)；D组细胞总数为392．00±7．61×104个，其对照组为 个实验组均有特征性的凋亡峰形成。A组凋亡率为14．2±1．7％， 其对照组为1．0±0．2％：B组凋亡率为15．4±0．8％，其对照组为 1．4±0．3％；C组凋亡率为24．4±1．2％，其对照组为1．6±0．3％。 A、B、c三个实验组问凋亡率有显著性芹异(P0．01)，其中A、 B两组与c组间凋亡率有显著性差异(A—C：PO．01；B-C：PO．01)。 另外，随处理时间的不J司各组的细胞周期分布发生改变。D组凋亡 率为9．9±1．6％，其对照组为1．6±O．3％。同时，部分细胞对碘化 丙啶染色剂通透性增加，表现为染色增强。进入循环周期中的细胞 出现不同程度的减少，提示部分细胞发生坏死。(3)rhTNF—a诱 导后SACC细胞彤态的改变：光镜观察见部分SACC细胞胞核缩小， 染色质凝集，呈块状或新月状，分布不均匀，呈畸形改变。电镜 观察可见凋亡的SACC细胞皱缩，胞膜完整，核固缩，染色质边集， 线粒体无明显肿胀，其他细胞器无明显改变。 结论：(1)低浓度rhTNF—Q可诱导SACC细胞发生凋亡。(2)TNF— Ct作用SACC细胞不同时间细胞周期分布发生改变。(3)较高浓度 rhTNF一Ⅱ可诱导SACC细胞同时发生凋亡和坏死。 2、ATRA诱导SACC细胞凋亡的实验研究 材料和方法：(1)实验材料：涎腺腺样囊性癌细胞株。(2)实验 方法：SACC细胞于RPMll640培养液(含10％新生牛血清)巾，37 M ℃恒温孵育。实验分三组：A组(10lI ATRA处理24h)、B组(10 uM M ATRA处理48h)、C组(10lJ