牙乳头干细胞分、培养的研究.pdfVIP

搞要 摘要 目的：探讨从人未发育完全的前磨牙牙根尖部牙乳头中分离、培养牙乳头干细 胞的方法，以期为组织工程在牙体及牙髓组织再生领域的应用找到更好的细胞 来源。 方法：取10至13岁接受正畸治疗的患者获取拔除的前磨牙；使用挖勺在尚未 形成根尖的牙根部分离牙乳头组织；采用组织块贴壁培养法从牙乳头组织中分 离出牙乳头干细胞，并计算细胞集落形成率；应用免疫荧光、流式细胞仪检测 牙乳头干细胞的标记物。 结果：组织块培养获得的第二代牙乳头干细胞在体外集落形成率为 10～20colonies／103细胞：牙乳头干细胞贴壁生长，呈长梭形或多角形，核浆比大； 原代培养细胞生长缓慢(约35天传代)，传代后的细胞生长快(3．5天一代)， 可连续传12代以上；牙乳头干细胞碱性磷酸酶阳性率为33．2％、巢蛋白阳性率 92．1％，但牙本质涎蛋白为阴性(l％)。 结论：使用组织块贴壁培养法能够有效地分离到根尖牙乳头干细胞，并能够传 代培养，牙乳头干细胞表面标志不同于牙髓干细胞(CD90‘)，其存在于牙乳头 组织中。 关键词：前磨牙；牙乳头；干细胞；培养 II Abstract ABSTRACT cellsfrom dental isolationandcultivationofstem ective：Tothe apical Obj explore papilla(SCAP)． dental was fromhuman immature papillaseparated healthy Methods：Apical usedisolate fororthodontic was to extracted purposes；Explanttechnique premolar ina-modificationof Medium thecellswerecultivated Eagle’S SCAP,then ofthe with20％fetalbovine Characterization supplemented serum； andflow ofSCAPWasdetectdedimmunofluorescence immunophenotype by evaluate cellsafter passage primary cytometry．Tocolony·formingefficiency,second wereused． cultivation ofceilsderivedfrom denta