碱性成纤维细胞长因子对大鼠下颌骨缺损植骨愈合的实验研究.pdf

中文 摘 要 碱性成纤维细胞生长因子对大鼠下领骨缺损 植骨愈合的实验研究 摘 要 目的:通过建立大鼠下领骨缺损的动物模型，探讨外源 性碱性成纤维细胞生长因子 (简称bFGF或FGF-b)对下领 骨缺损植骨愈合的影响;为临床上联合应用 bFGF,Bio-oss 骨和Bio-gide胶原膜治疗领骨缺损提供实验依据。 方法:选用63只体重约450克的Wistar大鼠，雌雄不 限，随机分为3组，实验组30只，对照组30只及空白对照 组3只。全麻下暴露大鼠左侧下领骨角部骨板，造成大小约 5mmX4mmX2mm的骨缺损区，并去除该区骨膜，每一骨 缺损区表示一个植骨单位。实验组的每一植骨单位植入含有 1ug(4伽g/mlX2和1)基因重组大鼠碱性成纤维细胞生长 因子 (rRFGF-b)的Bio-oss骨颗粒，其上覆盖Bio-gide 胶原膜;对照组的每一植骨单位植入含2知1生理盐水的 Bio-oss骨颗粒，其上覆盖Bio-gide胶原膜;空白对照组骨 缺损区不做任何处理。实验组和对照组大鼠于术后1,2,4, 6,8周分五批处死，取其左侧下领骨。第二至第五批大鼠于 处死前 11天分两次腹腔注射盐酸四环素，进行四环素荧光 标记。空白对照组大鼠于术后8周处死，取其左侧下领骨。 所取得的下领骨标本分别制作脱钙的石蜡切片和不脱钙的 硬组织切片，行组织学、荧光观察及骨组织形态计量学测定。 结果:组织学观察表明:术后 1周，对照组Bio-oss 骨颗粒周围有大量炎性细胞侵润，成骨细胞罕见，无新 中文 摘 要 骨生成。PCNA (增殖细胞核抗原)免疫组织化学染色呈 弱阳性。实验组Bio-oss骨颗粒周围炎性细胞罕见，有大 量纤维细胞和成骨细胞，且有大量新生毛细血管，亦未 见新生骨。PCNA免疫组织化学染色呈强阳性。术后 2 周，对照组Bio-oss骨颗粒周围有大量成纤维细胞和少量 成骨细胞，新骨罕见。PCNA免疫组织化学染色呈弱阳 性。实验组Bio-oss骨颗粒周围已可见新生骨板，并已有 完整的骨陷窝，颗粒之间有大量的成骨细胞和新生毛细 血管。PCNA免疫组织化学染色呈强阳性。术后4周: 对照组 Bio-oss骨颗粒周围可见大量成骨细胞和成纤维 细胞，并可见少量新生骨板，PCNA免疫组织化学染色 呈中度阳性。实验组颗粒周围新生成骨板明显增多，且 已开始互相连结，PCNA免疫组织化学染色呈中度阳性。 术后6周时:对照组无明显改变，PCNA免疫组织化学 染色呈强阳性。实验组新生骨板宽度进一步增加且分布 更加均匀，PCNA免疫组织化学染色呈弱阳性。术后 8 周时:对照组Bio-oss骨颗粒周围可见大量成骨细胞和成 纤维细胞，新生骨板量明显增加，且开始相互连结，PCNA 免疫组织化学染色呈中度阳性。实验组Bio-oss骨颗粒周 围布满新生骨板，且Bio-oss骨颗粒开始出现吸收现象， 其吸收区域被新生骨板所取代，PCNA免疫组织化学染 色几乎呈阴性。空白对照组可见大量炎细胞浸润，成骨 细胞及成纤维细胞罕见，未见新生骨板。荧光显微镜观 察:术后2周和4周时实验组植骨区四环素荧光强度和 双标一记线宽度均优于对照组。术后6周时实验组和对照 组四环素荧光强度和双标记线宽度相近。术后8周时， 中文 摘 要 对照组荧光强度及双标记线宽度优于实验组。骨形态计 量学测定表明:术后1周时:实验组PCNA免疫组织化 学染色阳性细胞核百分率显著高于对照组 (P0.01)。术 后2周时:实验组植骨区新生骨板面积;PCNA免疫组 织化学染色阳性细胞核百分率及骨矿化量均显著高于对 照组 (P0.05或P0.01)。术后4周时:实验组植骨区 新生骨板面积和骨矿化量均显著高于对照组 (P0.05或 P0.01)，而PCNA免疫组织化学染色阳性细胞核百分率 两组差异则无显著性 (P0.05)。术后6周时:实验组植 骨区新生骨板面积显著高于对照组 (P0.01)，两组骨矿 化量差异无显著性 (P0.05)，而PCNA免疫组织化学染 色阳性细胞核百分率则实验组显著低于对照组 (P0.01)。术后8周时:实验组植骨区新生骨板面积显 著高于对照组 (P0.01)，而PCNA免疫组织