国家基金申请成功范本.pdfVIP

国家基金申请成功范本 欢迎同行来论坛进行交流 科研中国SciE 收集整理 版权归原作者所有 http://www.SciE 翱翔科技服务中心 2005 年8 月12 日制作 二、立论依据 (包括项目的研究意义、国内外研究现状分析，并附主要参考文献及出处。) 对基础研究,着重结合国际科学发展趋势,论述项目的科学意义； 对应用基础研究,着重结合学科前沿、围绕国民经济和社会发展中的重要科技问 题,论述其应用前景 1. 电子信息杂交策略及其在猪基因组研究中的应用现状 电子信息杂交策略是依据比较基因组定位结果，充分利用猪 EST （expressed sequence tag, EST ）数据库的信息资源，借助计算机辅助进行基因的克隆，又称为 “silicon cloning ”。其基本原理是利用研究深入、标记稠密的哺乳动物基因组保守功 能基因的编码区序列（CDS ）作为信息探针，在猪 EST 数据库筛选同源 EST(s)(标准： 长度≥100bp，同源性 75%～95%) ，排除已克隆 EST(s)后进行拼接，设计引物获取基 因(cDNA) 全长（Altschul 等，1990；Mao 等，1998；A 田芳等，2000 ；Cirera 等， 2000 ）。该方法的特点是：（1）是建立在生物信息学分析的基础上，进行同源性比较 和计算机辅助克隆新基因，具有快速、简便、直接等优点；(2) 因为该方法在选择候 选基因时有很强的目的性，是一种与定位克隆、定位候选克隆策略并列的比较候选基 因法；（3 ）由于该方法是利用的是 EST 即 cDNA 部分序列信息，因而能够获得基因 (cDNA) 全长（Liang 等，2000 ）。 利用电子信息杂交策略在分离猪基因中的应用才刚起步（Cirera 等，2000 ），但 该方法在人及其它动物基因分离中已经有广泛的应用（Mao 等，1998；Bolognese, 等， 2000 ；毕安定等，2000 ；范玉新等，1999），由此可见，利用电子信息杂交策略分离 猪基因将具有良好的应用前景，在国内开展十分必要。 2. 猪 12 号染色体上基因及遗传与物理的研究现状与不足 12 号染色体是猪基因组中最小的中部着丝粒染色体，1999 年 2 月22 日申请者在网上检索 到的猪 12 号染色体上遗传与物理图谱现状如图 1、图2、图3。收录到猪 12 号染色体上的基因 和标记共 57 个，其中功能基因 26 个，微卫星标记 31 个。功能基因有：ALOX12 （二十碳四稀 酸-12-脂氧合酶，arachidonate 12-lipoxygenase ）；CDC42 （GTP 结合蛋白，porcine EST, GTP binding protein ）；EAD （红细胞抗原D，erythrocyte antigen D ）；GH1 （生长激素，growth hormone ）； HOXB6 （同源框B6，Homeobox gene B6 ）；NME1 （Nm23 protein ）；INHBB （抑制素β亚基， Inhibin, beta subunit ）；KICT （细胞骨架角蛋白类型I，Keratin type I, cytoskeletal ）；MCP （单核 苷酸趋化蛋白，Monocyte chemoattractant protein ）；PRKAR1A （cAMP 依赖性蛋白激酶调节亚 单位类型 1A ，cAMP-dependent protein kinase regulatory type1 alpha ）；POLR2 (大多肽 RNA 聚 合酶Ⅱ,large polypeptide RNA polymerase II) ；TK1(可溶性胸苷激酶 1,thymidine kinase 1, ２ soluble)；TP53 (肿瘤蛋白 53, tumour protein p53)；UMPH2 (尿苷酸磷酸水解酶