柴胡皂苷-d防肾小球硬化的体外实验研究.pdfVIP

中固协和医科人学侦Ij研究生论文 【中文摘要】 第一部分大鼠肾小球系膜细胞原代培养和鉴定 F1 的 cell，MC)，用免疫细胞 从SD人鼠分离、培养肾小球系膜细胞(Mesangial 化学的方法进行鉴定。 方 法 取SD大鼠麻醉后，在无菌条件下，取出肾脏，分别过80月、150目筛网， 边研磨边冲洗，在200目筛网上收集肾小球，用IV型胶原酶消化20分钟，20％ 胎牛血清的DMEM培养液终止消化，离心后用含有胰岛素的20％胎牛血清的 DMEM培养液悬浮肾小球，在5％C02培养箱中培养。用抗Actin单克隆抗体、 学染色鉴定。 结 果 原代培养的第3天有50--80％的肾小球贴壁，5天后肾小球上皮细胞开始 爬出来，一周后上皮细胞逐渐死亡；同时系膜细胞从肾小球中长出。在20天左 右，系膜细胞会满布瓶底。倒置显微镜下观察系膜细胞呈梭