缺氧预处理对大神经干细胞内源性保护作用的体外实验研究.pdfVIP

中文摘要 缺氧预处理对大鼠神经千细胞内源性保护作用 的体外实验研究 摘 要 目的：探讨不同时间缺氧处理对体外培养大鼠神经干细 胞(NSCs)的影响；缺氧预处理对大鼠神经干细胞再次经受 致死性缺氧的内源性保护作用以及促红细胞生成素(EPO) 在保护机制中的作用。 方法：取孕13天的SD胎鼠脑组织，悬浮法培养神经干 细胞，免疫组织化学方法鉴定细胞性质及分化潜能情况。施 加1～12小时不同时间缺氧培养，观察其对NSCs生长、分 化的影响，以MTT法测定缺氧对细胞活性的影响，并以 western 时为缺氧预处理条件，12小时为致死剂量缺氧处理条件，分 给予致死剂量缺氧处理，检测细胞存活率以观察预处理对 以及未经预处理的神经干细胞作对照组。根据预处理与致死 剂量缺氧的时间间隔分为两组：4小时组、24小时组，测定 细胞致死缺氧后即刻、4小时的EPO表达情况。 结果：悬浮法培养所获细胞的nestin鉴定为阳性，同时 具有神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞等多分化潜能。 缺氧时间不超过4小时，对NSCs大体形态、进一步培养、 分化无明显影