MiR--12--3p靶向调控CD151蛋白参与胃癌发生及CD151蛋白与中医证型相关性探讨.pdfVIP

摘 要 研究背景和目的： 近几年研究表明，一种小片段非编码的RNA与各种与这些胃癌相关性基因表达关 对各类胃癌相关性基因起微调控作用——转录后调控n’21，因此，miRNA通过转录后调 控的形式直接或间接影响某些蛋白的表达最后参与胃癌发生与发展全过程。 与细胞的增殖及迁移相关。有报道指出miR-124家族普遍在乳腺癌细胞中都存在异常 表达，在其它系统的癌组织也有类似的表达情况，因此推测miR一124家族中的 成员之一，它在多种人类肿瘤中表达水平显著高于正常组织，且与肿瘤的预后密切相 关口3。CDl51蛋白参与多种病理生理过程，包括细胞的黏附、迁移、半桥粒结构的形 成以及通过囊泡进行整合素的运输等H，5l，因此CDl51可能对肿瘤细胞的迁移，浸润和 转移起重要作用；中西医结合治疗胃癌是近几年临床上提倡的治疗方式哺1，因为中医 学在胃癌治疗过程中不仅能有效地抑制胃癌的发展，还能减低西医治疗时引起的不 适，提高患者对胃癌治疗的耐受力，最终提高患者存活率及生存质量。7’引，然而对胃癌 患者进行中医或中西医结合治疗关键在于辨证，辨证方能论治。 综上所述，本课题的研究目的如下： 1 蛋白表达的相关性，探讨miR-124—3p在胃癌发生与发展中的重要作用。 2通过细胞学实验验证miR一124-3p的表达水平对离体胃癌细胞的增殖、凋亡、侵袭 与迁移的影响，从细胞学的角度探究miR一124—3p与胃癌发展的相关性，通过靶点验 3研究不同中医症候临床分型胃癌患者癌变组织CDl51蛋白表达差异，探讨胃癌患 者中医证候临床分型与CDl51蛋白表达情况的相关性；初探CDl51蛋白表达水平与胃 癌转移相关性。 方法： l 临床上不同组织内miR-124—3p与CDl51的表达情况 (1)临床标本收集：以广州军区广州总医院消化内科住院部及门诊部确诊“胃癌” 患者为研究对象，收集患者胃镜下钳取的胃癌及癌旁周围正常组织为实验标本，同时 将一部分标本送至病理科进行病理诊断。 的检测，以U6基因作为内参照，以相对定量的形式确定胃癌与癌旁周围正常组织内 miR-124-3p表达水平高低。 水平。 2 MiR-124-3p对胃癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响 细胞(广州军区总医院医学实验科提供)，与空白对照组细胞一起构建高表达组、中 表达组及低表达组细胞进行实验。 胞的增殖与凋亡的影响。 miR一124—3p表达水平对离体胃癌细胞迁移能力的影响。 3 MiR一124—3p对细胞迁移相关基因CDl51调控的探究 行相关性分析。 URT。 存在于3’URT或5’ 4 CDl51蛋白胃癌组织中表达情况与中医证型及胃癌转移相关性 (1)中医辨证分型：根据《中医诊断学》相关要求，运用祖国医学四诊合参对所有“胃 脘痛”患者进行中医临床症候分型的辨证，仔细记录并在副主任医师以上级别中医师 指导下完成中医辨证分型。 (2)临床标本获取：以广州军区广州总医院消化内科住院部及门诊部确诊“胃癌” 患者为研究对象，收集患者胃镜下钳取的胃癌及癌旁周围正常组织为实验标本，同时 将一部分标本送至病理科进行病理诊断。 水平。 立不同CDl51蛋白表达水平组，进行划痕实验和流式细胞实验。 5统计学分析 资料均符合正态分布，pO．05。计量资料以均数±标准差(丁±S)表示，所有数据 均满足方差齐性，pO．05。 (2)采用单因素方差分析进行组间均数比较，多重比较采用LSD法。显著性水准Q 取0．05，双侧。 的相关程度，用r来表示，相关系数取值范围限于：一1≤r≤+1，越接近0表示相 关性越小，越接近±1表示正／负相关性越大。 结果： l 51的表达情况 临床上不同组织内miR一124—3p与CDl O．05) 量呈负相关，r一0．78． 2 MiR-124-3p对胃癌细胞增殖、凋亡及迁移的影响 下调组为7．278±3．193，pO．05。 对照组为7．132±0．791、下调组为7．832±0．944，pO．05。 2．450±1．234、下调组为2．000±0．794，pO．05。 7．850±2．059、下调组为8．150±2．084，pO．05。 2．605±0．560、下调组为4．865±0．790，pO．05。 3 MiR一124-3p对细胞迁移相关基因CDl51调控的探究 为73．810±10．115，r=一0．843，pO．05)； 示miR一124-3p对CDl51基因的3’UTR不存在明显的调控作用。 4