3-氯-1，2丙二醇对HEK293细胞的氧化性DNA损伤.pdfVIP

硕士生姓名：高花玲 指导教师：刘晓芳 副教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 目的：氯丙醇类化合物是目前国际上广为关注的食品污染物，其中以 3．氯．1，2．丙二醇(3．MCPD)在食品中污染量大、毒性强，因此常作为氯丙 醇的代表和毒性参照物。l999年下半年，我国出121至欧洲的调味品因为 3-MCPD含量超过进口国规定的限量标准而被停止销售，造成巨大的经济 损失。目前3．MCPD已经在许多食品和食品原料中被检测到，包括酸水解 蛋白、酱油、以酸水解蛋白为原料制成的固体汤料和调味品、麦芽制品、 焙烤的谷类食物、发酵的香肠、保健品等。另外，食品的包装材料和饮水 中也有发现。 3-MCPD是一种大鼠类致癌物，主要的靶器官是肾脏和睾丸，可以导 致大鼠睾丸间质细胞和乳腺的肿瘤、肾脏良性肿瘤、肾小管腺瘤、肾小管 癌，还可引起慢性进行性肾病。在体外遗传毒试验中，3一MCPD在没有S-9 的条件下对鼠伤寒沙门菌具有致突变作用，在S．9存在的情况下，致突变 作用没有增强。在酵母菌试验系统中也观察到致突变作用。3-MCPD在哺 乳动物姐妹染色单体交换试验和鼠淋巴细胞试验中均里阳性。3-MCPD在 高剂量时可以导致CHO．K1细胞DNA损伤。体内遗传毒试验显示在小鼠 骨髓微核试验和大鼠肝非程序性DNA合成(UDS)试验中均呈阴性结果。 3-MCPD在体内未观察到遗传毒活性。 损伤作用及可能的机制。我们也比较了HEK293细胞和CHO．K1细胞对 3-MCPD致DNA链断裂的敏感性。 方法：试验系统为HEK293细胞和CHO．KI细胞。通过单细胞凝胶电 损伤情况。为进一步探讨DNA损伤机制，以2，7．二氢二氯荧光素(DCFH) 法测定细胞内活性氧水平。通过免疫组化方法测定8一羟基脱氧鸟苷 细胞DNA的损伤程度。 mM．10 结果：1．25 mM的3．MCPD作用HEK293细胞lh后，DNA断 裂细胞形成彗星样的脱尾，尾长、尾距、尾DNA含量都明显增大，且呈 细胞和CHO．K1细胞接触3．MCPD(1．25mM．5 胞DNA链断裂程度明显增加，CHO．K1细胞则未显示DNA链断裂，提示 mM．10mM的3．MCPD与HEK293细胞接触lh后，可引起细胞内ROS水 mM．5 平明显增加。1．25 00 8．OHdG水平的表达明显增加。25 gM．11．tM的HT预处理HEK293细胞 显下降，并且呈现剂量关系。 损伤有关。 关键词：3．氯．1，2．丙二醇DNA链断裂HEK293细胞氧化应激 2 2一diol inducesoxidative 3一monochloropropane一1， DNA inHEK293 damage cells Master degree Qu candidate：Hua—ling Li功 Supervisor：ProfessorXiao-fang andEnvironmental Major：Occupational Hygiene Abstract