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  • 2016-03-24 发布于贵州
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Cr(Ⅵ)对L02肝细胞钙稳态的影响

Cr(VI)对L.02肝细胞钙稳态的影响 摘要 chromium,Cr 目的:在体外试验系统,探讨六价铬(hexavalent (VI))对L一02肝细胞钙稳态的影响及其可能机制。 方法:用L.02肝细胞为受试细胞,通过台盼蓝染色试验检测 Cr(VI)对L.02肝细胞存活率的影响,选取细胞存活率在75.0%以上的 为后续试验染毒浓度,细胞染毒处理时间分别为:0、5、20、40、60、 性(LDH)、质膜与线粒体ATP酶分别用化学比色法检测;细胞膜流 动性(荧光偏振度)与细胞内钙离子浓度([Ca2+】:)用荧光比色法检 测。 结果:Cr(VI)对L.02肝细胞存活率的影响:L.02肝细胞生存率 的相关系数v=.0.993(P0.01),两者呈负相关。 度升高出现的最早时间为染毒40分钟,染毒120分钟时比对照组升 高86.2%。在8009mol/L 早时间为染毒20分钟,染毒60分钟后则开始降低,120分钟时与对 照组相比无显著差别。 细胞脂质过氧化损伤:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间的 延长,细胞内MDA和GSH含量分别呈升高和降低趋势。其中, 现时间均为5分钟,在染毒120分钟时MDA含量较对照组增加242.3 %,GSH含量减少65.9%。 膜通透性和流动性改变:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间 的延长,LDH漏出和细胞膜荧光偏振度呈升高趋势,其中8001Jmol/L 处理组LDH漏出与荧光偏振度最早出现明显改变,效应最早出现的 时间分别为20、40分钟,在染毒120分钟时LDH漏出与荧光偏振度 分别较对照组增加90.2%、18.9%。 膜ATP酶活性变化:随着Cr(VI)染毒浓度的增大和染毒时间的 呈降低趋势。其中,800I.tmol/L处理组3种ATP酶活性最早出现改变, 效应最早出现时间为20分钟,染毒120分钟时3种ATP酶活性分别 较对照组降低64.3%、62.2%、40.0%。 调。Cr(VI)司-通过损伤细胞膜(增加了细胞外钙离子的内流)与抑制 ATP酶活性(减少细胞内钙离子向细胞外泵出及向线粒体转运)影响 L.02肝细胞内钙离子浓度,而Cr(VI)诱导的氧化损伤则通过引起损伤 细胞膜与抑制ATP酶活性,在L.02细胞内钙稳态失调中发挥作用。 关键词:Cr(VI);L.02肝细胞;钙稳态;钙离子;膜通透性 on E虢ctsofHexavalentChromiumCalciumHomeostasis inL·02 Hepatocytes Abstract theeffectsofhexavalent Objective:Toexplore on homeostasisinL一02 anditsmechanisms/nvitro calcium hepatocytes test. effectof cellsurvivalratewasmeasured Methods:The Cr(VI)on by blueexclusioninculturedL一02 in hepatocytes.L一02 trypan hepatocytes with50 alltestswereincubated pmol/L,200pmol/L,800lamol/L concentrationsof

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