不同剂量橄榄油大鼠血胆固醇水平的影响及其机制研究.pdfVIP

·中文论著摘要· 不同剂量橄榄油对大鼠血胆固醇水平 的影响及其机制研究 ．▲上．-JL 刖 吾 随着经济的发展和人们生活方式的改变，心脑血管疾病已经成为严重危害人 们健康的疾病之一。心脑血管疾病的病因目前尚不完全清楚，但血脂异常特别是 高胆固醇血症是导致心脑血管疾病发生发展的主要危险因素已经得到了大多数研 究的支持，所以维持正常的血脂水平显得尤为重要而且迫切。 肝脏在调节机体胆固醇平衡中发挥着重要作用。首先，3．羟一3一甲基戊二酸单 酰辅酶A还原酶(hepatic A，HMG—CoA reductase)是胆固醇合成的限速酶。其次，胆固醇在肝中转化为胆汁酸是其在体 内代谢的主要去路，而胆固醇7仅一羟化酶(Cholesterol 节胆汁酸合成的限速酶，所以这两个酶在维持机体胆固醇的内稳态中起重要作用。 本研究拟采用不同剂量的橄榄油替代高脂饲料中相应比例的猪油，观察对大鼠血 胆固醇水平、肝脏中HMG．CoAreductase 研究橄榄油是否能通过在转录水平调节这两个基因的表达而影响血胆固醇水平， 以求阐明橄榄油对大鼠血胆固醇水平影响的机制，为指导居民合理膳食，预防营 养相关的慢性病提供科学依据。 材料与方法 一、动物分组 重随机分为5组(每组9只)：基础对照组(基础组)，猪油对照组(猪油组)，橄 榄油低剂量组(橄榄油I组)，橄榄油中剂量组(橄榄油II组)，橄榄油高剂量组 (橄榄油III组)。基础组喂基础饲料，猪油组喂猪油高脂饲料(83．75％的基础饲料， 15％猪油，0．25％胆盐，1％胆固醇)。各橄榄油干预组的饲料分别用6％、10％、15％ 的橄榄油代替猪油高脂饲料中相同比例的猪油，干预8W。 二、样品采集 实验结束时，对大鼠进行称重；禁食12h后，在乙醚麻醉下，由腹主动脉采 血，分离血清；同时分离肝脏及双侧肾周、附睾周围和肠系膜等处脂肪，分别称 重记录。 三、指标分析 Eppendorf)上测定血清中总胆固醇(Totalcholesterol，TC)、低密度脂蛋白一胆固醇 (10w density 度脂蛋白-胆固醇(highdensitylipoprotein—cholesterol，HDL—C)。 (2)观察各组大鼠肝脏病理改变：观察各组大鼠肝脏的形态、质地及色泽的 改变；取小块肝组织放入10％中性甲醛中固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色， 光镜下观察大鼠肝组织病理学改变。 (3)计算肝指数和脏器周围脂肪／体重比值 ①肝指数(％)=肝重(g)／体重(g)x100； ②肾周脂肪重／体重比值(％)=x2俱IJ肾周脂肪重(g)／体重(g)x100； ③睾丸周围脂肪重／体重比值(％)=双侧睾丸周围脂肪重(g)／体重(g)x100； ④肠系膜脂肪重／体重比值(％)=肠系膜脂肪垫重(g)／体重(g)x100； ⑤总脂肪重／体重比值(％)=[双侧肾脏周围脂肪重(g)+双侧附睾周围脂 肪重(g)+肠系膜脂肪垫重(g)]／体重(g)x100； (4)肝脏中HMG．CoAreductasemRNA和CYP7A1mRNA表达量的测定： 将保存于．70C冰箱中的肝组织取出，按TakaraRT-PCR试剂盒说明扩增各组大鼠 reductase 肝脏中HMG．CoA mRNA和CYP7A1mRNA。逆转录反应条件为：30℃ 10min，42℃30min，99℃5min，5C 54。C 糖凝胶电泳，在电泳凝胶成像分析仪上照相，以各目标产物灰度值×面积与GAPDH 产物的灰度值×面积的比值表示该指标的相对表达量。 四、统计分析 2 实验结果用矗s表示，用SPSSl3．0统计软件进行单因素方差分析，组间两两 比较用LSD法，检验水准a=0．05。 结 果 一、各组大鼠一般状况及体重变化 实验期间，除橄榄油II组有一只大鼠死亡外，其余各组大鼠生长发育基本正 常，未见异常表现。各组大鼠体重增量、摄食量和饲料效价间的差异均无统计学 意义(胗0