谷氨酰胺对脓毒小鼠氧化应激损伤的保护作用研究.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………3 研究论文谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激损伤的保护作用研究 前言………………………………………………………………………………………6丹U舌………………………………………………………………………………………’6 材料与方法…………………………………………………………8 结果………………………………………………………………………………………·14 附图……………………………………………………………………16 讨论………………………………………………………………………………………·18 结论………………………………………………………………………………………·22 参考文献………”……………………………………………………23 综述……………………………………………………………………………………………··26 致谢……………………………………………………………………………………………”33 个人简历………………………………………………………………．．34 中文摘要 谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激损伤的保护作用研究 摘要 目的：探讨谷氨酰胺是否可以减少脓毒症小鼠的氧化应激损伤， 在危重症疾病氧化应激状态下发挥保护作用。 方法： 1．动物分组与造模方法： 5周龄雄性昆明小鼠30只，利用随机数字表，采取完全随机方 法将其平均分为三组，每组10只，分别设为对照组，(control，C组)、 内毒素组(LPS，L组)、谷氨酰胺组(Gln，G组)。 内毒素组与谷氨酰胺组采用腹腔注射内毒素的方法制造脓毒症 动物模型，内毒素的注射剂量为5ml／kg。对照组腹腔注射等量生理盐 水。造模成功后，谷氨酰胺组即刻尾静脉注射丙氨酰谷氨酰胺注射液， 注射剂量为0．759／kg。内毒素组尾静脉注射等量无菌生理盐水作为阳 性对照，对照组尾静脉注射等量生理盐水作为阴性对照。6小时后终 止实验，眼眶取血后采用颈椎脱臼法处死动物，解剖分离动物肝、肾 组织，迅速液氮冷冻。动物血低温放置，待血清析出后离心，取血清， 液氮冷冻待测。 2．氧化应激指标的测定方法： 每次测试样品前先将样品从液氮中取出在4。C冰箱中解冻。取动 物组织块在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重 匀浆介质(生理盐水2．7m1)于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小 剪尽快剪碎组织块。将玻璃匀浆管置于冰水浴条件下，手动匀浆，30 秒／次，间隔30秒，重复6～8次，制成10％的匀浆液。将制备好的10％ 匀浆液用普通离心机2500转／分，离心l5分钟，取上清液进行测定。 部分10％的匀浆液用生理盐水按体积比1：9稀释成l％的组织匀浆待 测。为达到实验结果稳定性，制备好的匀浆液都在在制备当天进行测 定。 取3组小鼠血清、肝、肾组织匀浆进行氧化应激指标谷胱甘肽过 中文摘要 氧化物酶GSH．Px(glutathion SOD(superoxide 体的测量方法按试剂盒说明书进行操作。 3．数据统计方法： 数据的收集与录入使用Excel2003，数据的描述与分析使用SPSS 16．0。首先对各组进行正态性与方差齐性检验，如果独立样本的数据 服从正态性与方差齐性，采取参数检验方法进行假设检验。两独立样 本的比较取用完全独立样本比较的t检验，三个独立样本的比较采用 完全独立多样本比较的单因素方差分析。进一步的两两比较采用 SNK-q法进行。如果资料不服从正态性与方差齐性，则采用多个独立 样本比较的Kruskal．Wallis H非参数检验，进一步的两两比较采用秩 转换的方差分析。检验水准0c=O．05，P奶．05，差异具有统计学意义。 结果： 1．谷氨酰胺组的小鼠血清、肝脏和肾脏中的GSH．Px、SOD水平 均高于内毒素组，差异具有统计学意义。 2．谷氨酰胺组的小鼠血清、肝脏和肾脏中的MDA水平低于内毒 素组，差异具有统计学意义。 结论：脓毒症造成氧化