植物生理实验报告：.docVIP

学号： . 植物生理学实验报告 学院名称： 生科学年级班别： 姓 名 张敏 2011年月实验一 红外线CO2气体分析仪测定光合速率 一、实验目的 1. 学习并掌握微量红外气体分析仪微量红外气体分析仪在密闭的系统中，由于同化室中的叶片进行光合后，系统中的CO2浓度不断下降，可用单位时间内同化室中CO2浓度的减少量或CO2浓度减少量所需的时间，根据叶片面积、同化室体积，计算光合速率。许多由异原子组成的气体分子对红外线都有特异的吸收带。CO2的红外吸收带有四处，其吸收峰分别在2.69μm、2.77μm、4.26μm和14.99μm处，其中只有4.26μm的吸收带不与H2O的吸收带重叠，红外仪内设置仅让4.26μm红外光通过的滤光片，当该波长的红外光经过含有CO2的气体时，能量就因CO2的吸收而降低，降低的多少与CO2的浓度有关，并朗伯—比尔定律A=lg(1/T)=Kbc 其中A为吸光度，T为透射比，是透射光强度比上入射光强度，c为吸光物质的浓度，b为吸收层厚度）。分别供给红外仪含与不含CO2的气体，红外仪的检测器便可通过检测红外光能量的变化而输出反映CO2浓度的电讯号。Dracaena reflexa），龙舌兰科。 2. 使用仪器：微量红外气体分析仪FF1-FQ-B。 1）按要求将气路系统连接起来2）将作用开关打到A（预热档），接通电源，打开红外仪电源预热，打开气泵电源，3）调零后，将参比管进气口和出气口相连以封闭参比管，将工作管进气口接高浓度CO2气（接外界大气），另一端接气泵，再通入密闭透明同化室，使气流流过同化室中的植物，最后回到仪器中检测。未照射强光，稳定一段时间测定CO2浓度C1。 （4）照射光强约6000Lux的强光，观察CO2浓度CO2浓度C2下降到190ppm，5min 后CO2浓度C2下降到170ppm，10min后CO2浓度C2下降到158ppm。根据： Pn＝ΔC×V×273×P/[Δt×S×22.4×(273＋t)×0.1013]μmol/m2s），ΔC为CO2浓度差C1-C2(ppm)，Δt为测定时间（s），S为叶片面积（m2），V为封闭同化室（包括气路系统）体积（L）t为同化室的温度P为大气压（Mpa）μmol/m2s。 六、分析与讨论 在没有照光情况下，测得CO2浓度C1为243ppm。照射强光后，3min 后CO2浓度C2下降到190ppm，5min 后CO2浓度C2下降到170ppm，10min后CO2浓度C2下降到158ppm，说明在光照过程中CO2不停地被消耗，植物光合作用吸收了CO2。吸收的CO2量能够反应植物光合作用的状况。进而通过相关公式计算出其光合作用速率。说明了CO2的消耗是与光合作用速率相关的。 利用这种方法测定植物光合速率时需要考虑同化室体积，因为同化室体积与植物株型不符，如同化室远大于植物，则测算出的光合速率可能偏高。测定时间并不是越长越好，因为长时间处于密闭的同化室，叶片蒸腾、光呼吸等生理变化会对测量产生干扰，比如强光照射时间长可能产生一定热量，使同化室温度上升。另外气路的密闭性也能造成测量误差，因为如果仪器气路漏气，会使同化室中植物吸收量计算值偏大，导致过高估计植物光合速率。 实验二 离心薄层色谱法分离叶绿素 实验目的 学习并掌握植物叶绿素提取、分离和吸收光谱曲线的绘制。 学习并掌握旋转薄层层析法。 实验原理 离心薄层色谱(centrifugal thin layer chromatography，CTLC)属于薄层色谱的一种，又叫旋转薄层色谱，是一种离心型连续洗脱的环形薄层色谱分离技术，主要是在经典的薄层色谱基础上运用离心力促使流动相加速流动。离心力用于分离，可以减少破坏，对沸点高、分子量大的化合物有利，可用于分离100mg左右的样品。 植物叶绿素a和叶绿素b在有机溶剂中溶解度不同，根据在固定相和流动相之间的吸附、分配作用的不同再加上离心加速度的作用使组分之间原有的差异加大从而提高了分离效果。Pinus tabulaeformis），松科。（图1） 2. 使用仪器：圆板薄层仪（图2）。 图1 油松 图2 圆板薄层仪 3. 实验步骤： （1）叶绿素提取。称取油松10g，剪碎，放入研钵中，加入少许CaCO3和石英砂，再加入适量丙酮充分研磨，静置，浸提液过滤到分液漏斗中，加入30ml石油醚，100ml 10%NaCl溶液使两相均匀混合，静置分层后弃下层，重复萃取1次，色素提取液备用。 （2）硅胶板制备。称取30g硅胶，1.2g石膏70ml水，充分混匀后制版。室温下放置12h，放80℃烘箱烘