青杨脊虎天牛CYP4G2基因片段的克隆、序列分析与表达.pdfVIP

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2016-03-24 发布于安徽
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昆虫学报，，（）： !#$ %#’(’)’*+$ ,++$ !#$% ’’( )* + ,)- . ,/+ 0112 ’+)+3/4/ 青杨脊虎天牛 !# ! $ 基因片段的克隆、序列分析与表达 ! 关桦楠，迟德富，宇佳，李晓灿（东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 *)’’+’ ）摘要：根据报道的十几种昆虫KLM+ 家族基因的氨基酸序列保守区域设计一对引物，利用I73MKI 技术扩增编码青杨脊虎天牛-.)’#/012 312#+12 中肠细胞色素氧化酶KLM+5 蛋白的CN2! 片段，构建原核表达载体:73KLM+5，将其转化入大肠杆菌中表达。序列分析结果表明，该基因（，登录号为 %20/3+0+$ ’)+ OP*’4 456+ 7 58?6?Q ）保守区域阅读框全长，编码个氨基酸残基，预测分子量和等电点分别为和；推导 :R+4)’ ,(- S *4 */ B4 QN ) B-) 的氨基酸序列与已报道的昆虫家族氨基酸序列一致性较高（），且具有细胞色素氧化酶的典型特 KLM+ /,T U (/ T 征。诱导后，电泳检测到一条大小的外源蛋白，与预测融合蛋白的分子量大小相应。差光 0M75 1N13M!5: QN KV 谱分析证明重组菌表达了有活性的:73KLM+5 。关键词：青杨脊虎天牛；细胞色素M+)’ 酶系；456+ 7 基因；克隆；表达中图分类号：文献标识码：文章编号：（） W4// ! ’+)+3/4/ ’’( ’+3’,)-3’( ，， #$%’( )*+,*-’( ./ *012*))’% %3 -456 32.(7*8) %3 !# ! $ 32%7 （：） %’()*+,-. /-.)0+-. 9 : #%$*%18*2. #*2.7;-’/.* ’ 1.+,*/0+,02 +(’0 ， ! ，，（， 5X!2 Y32? KY0 N83R LX O$ Z0 [$D3K? N8#E;8?E DF Z$F8 ?H 1C$8?C8G 2D#E@8GE RD#8GE#\ ，，） X?$J8#G$E\ Y#S$? *)’’+’ K@$? ： 6;)82.-8 ! $# DF #$;8#G ]G H8G$=?8H SG8H D? E@8 #8