四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性.pdfVIP

昆虫 学 报 四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的 建立及其生物学特性 丁伟峰 冯 颖 张 欣 李 娴 王成业 谢世聪 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室 昆明 摘要 目的建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系并对其生物学特性进行研究 方法使用 改良配方的培养基并辅以胎牛血清通过原代和传代培养建立达摩凤蝶新孵幼虫细胞系 通过显微观 察细胞活力分析核型分析和分子鉴定获得 个新建细胞系的生物学特性数据 使用 杆状病毒表 达系统构建重组分泌型碱性磷酸酶杆状病毒 使用有限稀释法测定达摩凤蝶细胞系对 的半数组织培养感染剂量 比较达摩凤蝶细胞系对的敏感性 结果建立了 个 贴壁生长的达摩凤蝶新孵幼虫细胞系 及 且均传至 代以 上 形态学方面细胞系 和 较为相近均由圆形梭形以及多边形细胞组成细胞系 主要为圆形细胞而 主要为类似表皮细胞和纤维状细胞 细胞增殖动力学方面 个细胞系的 群体倍增时间分别为 及 核型分析显示 个细胞系染色体数量均呈正态分布其中 以及 的染色体数目分布区间比较接近在 条之间 的染 色体条数相比偏少在 条之间 通过比对 个达摩凤蝶细胞系和虫卵的细胞色素氧化酶亚基基 因序列证明 个新建细胞系来源于达摩凤蝶组织 比较 个细胞系对敏感性发现 对 此病毒较为敏感可作为重组杆状病毒表达的宿主 结论虽然 个新建达摩凤蝶细胞系的来源相同具有相同 的遗传背景但其生物学特征仍有明显差异具有进一步研究的价值 关键词 达摩凤蝶 新孵幼虫 昆虫细胞系 分泌型碱性磷酸酶 重组杆状病毒 中图分类号 文献标识码 文章编号 基金项目 国家林业局引进国际先进林业科学技术 项 目 中央及公益性科研院所基本科研业务费专项资金 作者简介 丁伟峰 男 年生 新疆乌鲁木齐人 助理研究员 从事昆虫细胞工程相关研究 通讯作者 收稿日期 接受日期 期 丁伟峰等 四个达摩凤蝶新孵幼虫细胞系的建立及其生物学特性