血红互氧合酶-1在肝硬化门脉高压大鼠多脏器的表达及其意义.pdf

血红素氧合酶一1在肝硬化门脉高压 大鼠多脏器的表达及意义 博士生姓名：郭世斌 指导教师：段志军教授 专业名称：内科学 摘要 目的：我国是乙肝大国，每年有许多患者发展成肝硬化甚至门脉高压，而门 脉高压导致的各种并发症，如肝肾综合征、肝肺综合征等，也会显著增加患者的 死亡率。目前对肝硬化门脉高压及其各种并发症的病理生理机制的认识还未完全 清楚，治疗效果也不满意。因而探讨肝硬化门脉高压及其各种并发症的发生机理， 以寻求干预途径和方法势在必行。以往研究发现，一氧化氮(nitricoxide，NO)，作 为一种血管扩张物质，在肝硬化外周血管扩张和高动力循环的发生、发展中起着 重要的作用，在肝肾综合征和肝肺综合征的发病中也起着一定的作用。内源性一 氧化碳(carbonmonoxide，CO)是血红素氧合酶．1(heme 解产物，作为体内一种重要的气体信使分子，在很多方面和NO相似，参与体内的 多种病理生理过程。我们以前的实验发现，HO--CO系统在肝纤维化大鼠模型的肝 脏中表达增加，并对肝脏起着保护性作用。目前对于HO．CO系统的研究主要集中 在肝细胞的保护和抗炎作用，对其在肝硬化门脉高压阶段所起的作用，是保护肝 脏还是加重肝细胞损害，国内外报道的文献很少；在肝外组织器官的研究多集中 在单一脏器，缺乏多脏器系统全面的研究，HO-1在肝外器官，如肾脏、肺脏中的 表达是否具有组织差异性，以及HO．1在这些脏器中的作用机制如何，目前仍然不 清楚；此外，针对肝硬化及并发症的相应干预治疗的研究较少，而且缺乏在疾病 不同阶段对该系统变化及作用的认识。本研究的目的就是探讨在肝硬化门脉高压 阶段，HO．1在肝脏、肾脏、肺脏中的表达与这些脏器结构、功能改变之间的关系， 通过给予HO．1的诱导剂和抑制剂来调控HO一1的活性，揭示其在各脏器中的作用， 为寻找治疗肝硬化及门脉高压并发症的方法提供理论基础。 本研究共分三部分。 第一部分HO．1在肝硬化门脉高压大鼠肝脏中的表达及意义 第二部分HO．1在肝肾综合征大鼠模型肾脏中的表达及对肾脏病理和肾功能 的影响 第三部分HO．1在肝肺综合征大鼠模型肺脏中的表达及对肺血管和肺功能的 影响 方法：取健康雄性SD大鼠44只，随机分成4组：假手术(SH)组8只、肝硬 PH组应用胆总管结扎的方法制备肝硬化门脉高压大鼠模型，4周后模型形成取材。 腔注射一次，PH组给予等量的生理盐水腹腔注射。所有大鼠最后24小时在生物 笼中收集尿量，’检测尿肌酐、尿钠；生物机能实验仪测定大鼠的门静脉压力、平 均动脉压，超声测量肾动脉血流量，检测动脉血气，之后将大鼠处死，采集静脉 血；取肝、肾和肺组织。通过免疫组织化学的方法观察大鼠肝脏、肾脏和肺脏HO．1 检测大鼠上述脏器HO．1 mRNA的水平。HE染色观察肝脏、肾脏、肺脏的结构改 肺泡一动脉氧分压差(A．aP02)；采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转 移酶(alanine A．aP02反映肺功能变化。 ． 结果：1、肝硬化门脉高压大鼠模型复制成功 (1)PH组大鼠毛色蓬乱而不光滑，精神萎靡，食欲不振，活动减少，尿色黄， 便色浅，腹部膨隆；解剖腹腔内见大量腹水； 4- 45．77U／Lw156．84-18．28 IU／L，PO．05)； 4- 4-2．36 w9．24 (3)与SH组相比，PH组的门静脉压力显著升高(15．56mmHg O．76 mmHg，PO．01)； q-12