欧当归内酯a的物利用度及其对aβ清除的影响.pdfVIP

摘 要 背景： 阿尔茨海默病(Alzheimer’SDisease，AD)即老年性痴呆，是常见的进行性加 重的神经退行性疾病，可因并发症而死亡。发病率随年龄而增加，患病率随着步入老 龄化社会而逐步增加。AD将成为医学界和公众都关注的重大健康问题，且目前并无理 想的治疗药物，而中医药相关研究因其多途径、多靶点的治疗机制正成为研究热点。 目的： 作用及作用机制，为抗AD的研究提供参考。并通过探讨当归芍药散醇提物、川芎醇 提物和川芎有效成分欧当归内酯A(1evistolideA，LA)的含量测定及其在SD大鼠 血浆和脑中的药代动力学过程，研究提高欧当归内酯A的生物利用度的方法，为延长 吸收寻找更有效的手段。 方法： 1．药效学实验 物的无毒最佳浓度和作用时间。 (2)ELISA法检测LA对M146L细胞中Af)I-42产生量的影响。 (3)用Western 达量的影响。 2．药动学实验 (1)川芎醇提物和当归芍药散醇提物中LA的含量测定 分别制备当归芍药散醇提物和川芎醇提物，建立并验证LA含量测定的HPLC-UV 方法，包括线性，准确性，重复性，检测限，定量限，稳定性的验证。 (2)LA与川芎醇提物和当归芍药散醇提物中LA的药代动力学比较研究 ①建立LC—MS／MS测定大鼠LA血药浓度法。 32只3009左右雄性SD鼠随机分为4组：单体灌胃组、药材灌胃组、复方灌胃组 脉取血，于LC—MS／MS中测定其血药含量，绘制时间一药物浓度曲线，用NONMEM Program version 1．1软件拟合药动参数，并对各组药动参数进行比较。 ②建立LC—MS／MS测定大鼠LA脑药浓度法。 绘制时间一药物浓度曲线，用NONMEM version Program 1．1软件拟合药动参数，进行 比较。 结果： 1．药效学实验： 的LA溶液(DMSO终浓度为0．08％)对细胞活性没有影响，无细胞毒性。 lOmM的浓度均能降低细胞外AD卜42的含量(PO．05)。 (PO．05)。 2．药动学实验： (1)经方法学验证，当归芍药散醇提物和川芎醇提物中LA含量测定的HPLC—UV 方法符合体外药物含量测定的方法学要求。经测定，当归芍药散醇提物和川芎醇提物 中LA的含量分别为0．119％和3．2％。 (2)经方法学验证，大鼠血浆中当归芍药散醇提物和川芎醇提物中LA含量测定 的HPLC方法符合体外药物含量测定的方法学指导原则的要求。测定各组LA的血药浓 度并进行数据分析发现，LA在SD大鼠血浆内的药动学过程为二房室模型。复方组的 ti／2和AUC卜。值比其他组的大(PO．05)，LA的生物利用度为7．5％。 (3)经方法学验证，大鼠全脑中当归芍药散醇提物和川芎醇提物中LA含量测定 的HPLC—UV方法符合体外药物含量测定方法学指导原则的要求。测定各组LA的脑药 浓度并进行数据分析发现，LA能透过血脑屏障，在给药后30分钟达到最大浓度(约 43ng／mL)。 结论： 1．LA能透过血脑屏障，从而发挥对Apl-42的清除作用，这可能与其调节血脑 屏障上的转运体，从而外排Ap，使之减少在脑中的积聚的机制有关，对AD的治疗研 究上可能具有一定的价值和意义。 2．本研究建立并验证了快速、简便、可重复和稳定可行的欧当归内酯A含量的 LC．MS／MS测定方法，并用于大鼠体内的药代动力学研究。 3．与LA单体和川芎醇提物比较，当归芍药散能显著提高LA的生物利用度，给 药方便且低风险，吸收程度高和作用时间更长。 关键词： 阿尔兹海默病；p淀粉样蛋白；当归芍药散；欧当归内酯A；血脑屏障 lI Bi oavai I abi I i ofI evi stoI i deAandi tsi nfI uenceonAB ty CI earance ofTraditionaIChineseMediCiRe Speci