止哮平喘方对哮大鼠嗜酸性粒细胞凋亡及调控基因表达的影响.pdf

摘要 1目的 本课题通过观察止哮平喘方对哮喘大鼠症状评分、肺溢流量、气管条 表达等的影响．围绕EOS的凋亡，从免疫反应、气道炎症、气道高反应性 及气道重塑等方面探讨止哮平喘方的作用机制。 2方法 以卵蛋白致敏和激发复制大鼠哮喘模型。sD大鼠随机分为6组：正 常对照组(简称正常组)、哮喘模型组(简称模型组)、地塞米松治疗组(简 称地塞米松组)、止哮平喘方小剂量组(简称小剂量组)、止哮平喘方中剂 量组(简称中剂量组)、止哮平喘方大剂量组(简称大剂量组)，每组10只． 实验第8天，即第2次致敏的同一天开始给药，共治疗14天．’观察各组 大鼠一般生活情况，并对末次激发10min时大鼠的症状表现进行评分．末 次激发24h后，进行肺溢流实验，处死大鼠，采集标本。检测离体气管条 图像分析系统测量气道重塑参数，TUNEL法测定肺组织中EOS凋亡情况， 原位杂交法测定肺组织Fas、Bcl-2mRNA的表达． 3结果 3．1大鼠激发时的一般状况 模型组大鼠在吸入OVA激发后即出现躁动不安、搔抓头面及全身皮 毛、呼吸急促和明显的腹式呼吸、打喷嚏、口鼻紫绀，呼气相喘鸣音等症 状．反复激发后，大鼠毛色失去光泽，精神不振，反应迟钝，体重较正常 组明显减轻(尸0．05)．应用药物干预后，各治疗组症状明显改善。 3．2症状积分比较 应用药物干预后，各治疗组大鼠激发后症状积分减少，与模型组比较 有显著性差异(尸O。01或尸0。05)。 3．3肺溢流量差值和离体气管条张力变化比较 各治疗组与模型组比较，大鼠肺溢流量变化明显减少，有显著性差异 力明显降低(尸0．01或尸0．05)。 3．4哮喘大鼠全血和BALF中白细胞总数、EOS百分率比较 模型组大鼠全血和BALF中自细胞总数、EOS百分率显著增加，与正 总数、EOS百分率均降低，与模型组比较均有显著性差异(尸o．01或尸 0．05)，其中地塞米松组和止哮平喘方大剂量组全血和BALF中自细胞总数 和EOS百分率与正常组比较无显著性差异(尸0．05)，中剂量组全血白细 胞总数和EOS百分率与正常组比较无显著性差异(尸0．05)． 3．5哮喘大鼠血清IgE、IL-5、IL-13含量比较 剂量组血清IgE含量与正常组比较无显著性差异(尸0．05)，各治疗组血 清IL-5和IL-13含量与正常组比较，无显著性差异(尸0．05)。 3．6支气管肺组织形态学光镜观察 哮喘模型组大鼠气道炎症明显、管腔狭窄、肺泡隔明显增宽．平滑肌 增厚；地塞米松组和止哮平喘方大、中剂量组均能显著减轻大、小气道及 肺组织炎症情况，支气管肺组织大致正常；而小剂量组则变化小． 3．7气道重塑图像分析参数比较 n 3．8大鼠肺组织EOS凋亡及Fas，Bcl-2mRNA的表达 4结论 以OVA致敏和激发，可以成功复制大鼠哮喘模型．止哮平喘方能通过 直接松弛气管平滑肌，解除气道痉挛；降低全血和BALF中自细胞及EOS 数量；降低血清IgE、IL-5、IL-1 3含量；促进肺组织FasmRNA表达、抑 炎症，抑制气道高反应性和气道重塑，发挥平喘作用。 主题词哮喘；气道炎症；细胞凋亡；基因表达； @止哮平喘方 m ofZhi XaoPi onEosi i I i Sand Effect i ngChuanFangnophApoptos i n i onofCentreI I i GeneAsthmati cRats Express ng i aI i i ti onaI Chi neseI nternaI Medi ci Re Specty=Trad Author=Pan Fengman Tutor=Professor WangPeng Abstract 1 ire： Object To inve