NCCLS的评价方案.docVIP

第五节 CLSI标准与指南的简介 临床实验室标准化协会（CLSI， 以前称NCCLS） 是一个国际性的、学科间的、非盈利性的、制定标准的教育组织，它促使人们对标准和指南达成共识并促进其在医疗保健系统内的应用。在为临床试验与相关的医疗问题制定标准与指南时，CLSI 实施了它所特有的达成一致的过程，因而得到全世界的认可。除了促进制订并使用统一的标准和指南之外，CLSI 还提供了一个公开的、无偏见的论坛以讨论那些影响临床试验和医疗保健质量的关键问题。 建立一个新的分析方法，或引进新的方法，试剂和仪器都应对它们的技术性能如精密度，方法比较，线性范围，以及干扰等作出评价。CLSI制订了一套评价方案(evaluation protocols，EP)，能客观而正确地对上述技术性能作出评价。以下对各评价方案作逐一简述。 一、EP-5 定量实验精密度评估方法 EP-5文件于1992年推出试用版，在1999年被认可。该文件最初由设备生产商对他们的方法学精密度进行评估。精密度通常作为评价规范条件下某一独立实验结果是否一致的指标。 在ISO 3534 和ISO 5725 文件中, 关于精密度的定义有详细论述。 目前, 在最小变异条件下实施(相同的操作者、方法、设备、实验室)的重复性实验被用来评价精密度。 EP-5文件规定, 精密度是评价分析方法、试剂和仪器给出结果的可重复程度，且反映精密度好坏的指标是变异系数(CV)。CV越小精密度越好，反之则差，故有人称其不精密度。用本方案评价可以计算出批内、批间、日间和总CV，其中总CV最重要，它代表整个分析体系的可重复程度。 EP-5文件作为定量实验精密度评估指南, 包括了对于方法学和设备进行的详细论述。 该文件对现行方法进行重要修改是否可行也进行了论述。 当对体外诊断设备或者方法进行修改时,必须保证该设备的某些重要性能参数没有改变。 典型的改变包括试剂、样本来源、校正物或者质控物的改变。 二、EP-6??定量检测方法线性的评价 常规方法应具有较宽的分析范围，一般应覆盖临床可能出现的高值。线性范围(Linearitv range)是分析方法的一个重要技术指标，它能判断对某一分析方法(试剂或仪器)测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围。而检测线性范围是通过可接受的分析测定范围的高和低值拟合成一条直线。目测法是实验室工作人员最早考虑使用的也是最基本的线性评价方法。其步骤一般是先检测一系列稀释样品，然后作图；以X轴表 示标准溶液每个浓度的理论预计值、y轴表示实际测定值的均值，连接各点并观察。因为目测法过于主观，最好能有客观地采用统计学方法的线性评价方式。为了解决以上难题，美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1982年组成了线性评价工作委员会，成员分别包括厂商代表、专业人员和政府代表。经过不懈努力，NCCLS在1986年颁布了建议性文件——EP6。根据此文件，线性评价应：(1)至少需要足量的五等分浓度，覆盖检测范围；(2)每个浓度至少重复2次检测以减小随机误差；(3)定标并确定质控在控后才能检测，检测时样品应随机排列；(4)最小二乘法回归分析拟合最适直线。EP-6文件兼顾线性评价的主观目测和客观统计，受到实验室工作人员欢迎并被广泛采纳使用 三、EP-7??临床化学的干扰试验 干扰是指在测定某分析物的浓度或活性时，受另一非分析物影响而导致测定结果增高(正干扰)或降低(负干扰)。干扰物质可分为内源性(标本中存在的)和外源性(外界污染的)两类。内源性的干扰物有：(1)血清中固有的代谢产物，如肌酐酶法测定时血清中的肌酸等。(2)病理情况下生成的：如胆红素，脂类，蛋白质，血红蛋白等。(3)治疗药物，肠道营养等。外源性干扰有：(1)标本收集中的添加物如抗凝剂、防腐剂、稳定剂、容器和塞子的污染等。(2)试剂中的杂质和杂酶等。干扰对于临床测试非常重要，测定结果与“真值”间的偏差，可由测定方法的系统误差，不精密度和干扰共同引起。干扰可能是造成误差的一个原因，如果干扰物是恒定的将引起恒定误差，如干扰物随病理生理因素影响，将引起随机误差。因此，实验室应了解各测定方法的干扰情况，临床上主要是指溶血，黄疸和脂血和某些特殊项目的特殊干扰。 干扰试验方法分为两种：(1)“配对差异”试验。即将不同浓度的干扰物加入到实验标本中，然后分别测定加与不加干扰物的标本，比较二者有无偏差，并了解干扰物浓度与偏差程度的关系。(2)用病人标本作偏差分析。选择病人标本，如心脏、肝脏和肾脏疾病患者，用过某种可能有干扰的药物的病人，以及含有高胆红素、高血脂和血红蛋白的标本，用参考方法和试验方法同时测定，将试验方法的结果和参考方法比较，以确定有否干扰和干扰程度。这两种干扰试验各有优缺点。第一种方法的不足之处是实验标本的介质可能与病理标本的介质不尽一