杭白菊挥发油提鉴定及功效研究.pdf

中文摘要 杭白菊挥发油提取鉴定及功效研究 中文摘要 近年来中药资源的开发和利用成为我国乃至世界范嗣内的热点，尤其药食两用植物在保健食品 和药品的利用方面得到了很大的发展，通过各种提取手段提取其有效成分，开发功效成分明确的深 加工产品，成为保健食品和药品市场的主要研究方向。 菊花是中国卫生部公布的药食两用中药资源。现有研究表明，菊花中所含的挥发油与其生理活 性密切相关。本实验旨在研究杭白菊挥发油水蒸气提取的最佳提取方法，分析杭白菊挥发油的有效 功能成分，并结合功效实验评价其功能，为进一步将其开发为保健食品、食品添加剂及药品提供实 ’ 验依据。 目的：建立水蒸气蒸馏法提取杭白菊挥发油的最佳工艺条件；分析杭白菊挥发油的化学成分并 建立杭白菊中p榄香烯的测定方法，同时结合杭白菊挥发油功效实验，为利用杭白菊挥发油开发成 为保健食品、食品添加剂及药品提供依据。 方法：采用水蒸气蒸馏法，正交设计考察了粉碎度、加水量、浸泡时间和蒸馏时间对杭白菊挥 发油提取率的影响，确定最佳提取条件；利用气相色谱．质谱联用仪分析杭白菊挥发油各组成成分， 并使用气相色谱内标法测定杭白菊中B．榄香烯的含量。通过测量抑I蠹环、最低抑制浓度、最小杀菌 浓度，研究杭白菊挥发油的抑菌、杀菌效果；通过给予内毒素致新西兰兔发热模型腹腔注射给药， 观察给药后新西兰兔的体温变化，并使用高效液相色谱法测定发热新西兰兔下丘脑组织中单胺类神 经递质的含量，评价杭白菊挥发油的解热作用及其机理；体外通过MTT法检测杭白菊挥发油对人 肝癌细胞HepG．2的增殖抑制作用并使用流式细胞术测定细胞凋亡情况，体内通过干预S180荷瘤小 鼠后检测胸腺(脾)指数、吞噬功能变化对杭白菊挥发油的抗肿瘤作用进行研究。 结果：影响杭白菊挥发油提取率的主要因素为粉碎度，其次为提取时间、加水量、浸泡时间， 13小时，在此条件下挥发油提取率为0．55％；杭白菊挥发油经气相色谱一质谱联用仪分析，共分离出 白菊挥发油对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、甲型链球菌、肺炎双球菌、枯草芽胞杆菌、白色念 珠菌、新生隐球菌7种细菌有抑菌作用，但对大肠杆菌、绿脓杆菌、福氏志贺菌无效。通过对内毒 素致新西兰兔发热模型解热作用研究发现，菊花挥发油高、中、低剂量组都具有解热作用，起效时 间与安乃近相似；高效液相色谱法测定发热新西兰兔下丘脑组织中单胺类神经递质的含量结果表明， 新西兰兔下丘脑组织中NE、DA、5．HT含量发生变化。杭白菊挥发油处理人肝癌HepG．2细胞后， 细胞的生长增殖明显被抑制，作用呈现剂量相关性；另外，杭白菊挥发油对S180荷瘤小鼠的肿瘤具 有抑制作用，高剂量对肿瘤抑制率达到54．94％，可提高荷瘤小鼠的胸腺指数。 结论：水蒸气蒸馏法提取杭白菊挥发油的最佳提取工艺条件大大提高了杭白菊挥发油的提取 率，简单安全、不污染环境、适用于工业生产；利用气．质联用分析杭白菊挥发油的主要成分，丰富 了国内外对于杭白菊的成分研究，为进一步利用打下了基础；气相色谱内标法测定杭白菊中争榄香 烯的方法简便，准确，重复性好，可用来测定杭白菊中p．榄香烯含量：杭白菊挥发油对供试的革兰 氏阳性菌、霉菌都有相对较强的抑杀作用，抗菌谱较广，在革兰氏阳性菌中，又以对球菌的抑制效 果为最佳，但对供试的革兰氏阴性杆菌没有抑制作用：杭白菊挥发油毒性小，对内毒素所致新西兰 兔体温升高有显著的降低作用且呈剂量相关性，机理研究认为挥发油引起了下丘脑组织中NE、DA、 5-HT含量变化，使5．HT、DA、NE量上的对比关系发生了变化，导致体温调定点的下降而发挥 解热作用。杭白菊挥发油能增强细胞免疫功能，在体内、体外都具有一定的抑制肿瘤作用，可以诱 东南大学学位论文 导肿瘤细胞的凋亡。本研究对推动对我国传统中药材的开发和利用，充分利用我国植物资源有重要 意义，为开发新的保健食品、食品添加剂以及药品提供了实验基础。 关键词：杭白菊；挥发油；提取；鉴定；抑菌；解热；抗肿瘤 II ． 英文摘要 STUDIESoNEXTRACTPRoCESSINGAND oILANDITS DETERMINATIoNo