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三聚氰胺的性质及检测方法 2011级食工一班 郭佳 170112011011 1 三聚氰胺的理化性质 三聚氰胺（英文：Melamine）俗称密胺、蛋白精，IUPAC命名为“1,3,5-三嗪-2,4,6-三胺”，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物℃高温下可分解产生含氢化氰、氮氧化物和氨等有毒和刺激性的烟雾。 三聚氰胺呈弱碱性,在中性或弱碱性环境下能与甲醛缩合形成各种羟甲基三聚氰胺,但在微酸性(pH值5. 5~6. 5)环境下,可以与羟甲基的衍生物进行缩聚反应而生成树脂产物。另外,三聚氰胺三种同系物:三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺。 三聚氰胺是一种用途十分广泛的有机化工原料，对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。 熔点(℃)：300（升华） 相对密度（水=1）：1.573 相对蒸气密度（空气=1）：4.34 饱和蒸气压(kPa)：6.66 水中溶解度(20℃)：0.33g 3.5.2 定量测定 待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。 3.5.3 结果计算 试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按式（1）计算获得： A × c × V×1000 X= × f ……………………（1） As× m×1000 式中： X —— 试样中三聚氰胺的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； A —— 样液中三聚氰胺的峰面积； c —— 标准溶液中三聚氰胺的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； V —— 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）； As —— 标准溶液中三聚氰胺的峰面积； m —— 试样的质量，单位为克（g）； f —— 稀释倍数。 3.6 空白实验 除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。 3.7 方法定量限 本方法的定量限为2 mg/kg。 3.8 回收率 在添加浓度2 mg/kg～10 mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。 3.9 允许差 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。 4 第二法 液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS） 4.1 原理 试样用三氯乙酸溶液提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用液相色谱-质谱/质谱法测定和确证 ，外标法定量。 4.2 试剂与材料 除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 乙酸。 乙酸铵。 乙酸铵溶液（10 mmol/L）：准确称取 0.772 g 乙酸铵于1 L 容量瓶中， 用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。 其他同3.2。 4.3 仪器和设备 液相色谱-质谱/质谱（LC-MS/MS）仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 其他同3.3。 4.4 样品处理 4.4.1 提取 奶粉 称取1 g（精确至0.01 g）试样于50 mL具塞塑料离心管中，加入8 mL三氯乙酸溶液和2 mL 乙腈，超声提取10 min，再振荡提取10 min后，以不低于4000 r/min离心10 min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，做待净化液。 4.4.2 净化 将4.4.1中的待净化液转移至固相萃取柱中。依次用3 mL水和3 mL甲醇洗涤，抽至近干后 ，用6 mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1 mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物（相当于1 g试样）用1 mL流动相定容，涡旋混合1 min，过微孔滤膜后 ，供 LC-MS/MS 测定。 4.5 液相色谱-质谱/质谱测定 4.5.1 标准曲线的绘制 取空白样品按照 4.4 处理。用所得的样品溶液将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到的浓度为 0.01、0.05、0.1、0.2、0.5 μg/mL 的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以定量子离子峰面积- 浓度作图，得到标准曲线回归方程。基质匹配加标三聚氰胺的样品 LC-MS/MS 多反应监测质量色谱图参见附录 A 中的图 A.2。 4.5.2 定量测定 待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。 4.5.3 定性判定 按照上述条件测定试样和标准工作溶液，如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致（变化范围在±2.5%之内）；样品中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表1的规定，则可判断样品中存在三聚氰胺。 表1 定性离子相对丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50% 20%至 50% 10%至 20% ≤10% 允许的相对偏差 ±20% ±25% ±30% ±50% 4.5.4 结果计算 同3.5.4。 4.6 空