细胞周期相关基因微阵列的构建及在中药筛选中的应用.pdfVIP

细腔周期相关基因微阵列的构建及其在中药筛选中的应用 中楚摘要 摘 要 肿瘤死亡率第二位，为当前需要重点研究的疾病，因此筛选抗肝痛药物具有重要的现 实意义。传统中药用于治疗癌症已有悠久的历史，中药治疗癌症具有多位点，副作用 小等优点，但同时中药存在药效机制不明确和药方复杂等缺点，为中药抗癌治疗的研 究带来了一定的困难。近年来随着细胞生物学和分子生物学对肝癌发生的本质的阐明， 抗癌药物的研究水平有明显提高，中药治疗肝癌己显示出较大的优势，并得到广泛的 应用。 已证明细胞周期调控异常与肿瘤发生密切相关，本研究选择细胞周期与损伤检测 拥关的基因作为本文研究中药作用机理的靶点，制备了包含24个基因的cDNA微阵 列，并检测了微阵列的各项参数，证明微阵列结果的可靠性。 本研究选择了18利，具有抗肿瘤潜力的中药，以肝癌细胞系SMMC-7721细胞作为 r13成纤维细胞作为正常细胞检测药物的毒性，其中五种对 初筛模型，NIH一3 Linderae)、紫草(HebraArtemisiae 和远忐(Radix (IC50)；通过荧光染色技术和流式细胞技术研究了五种中药作用的细胞学机理；并采 用本实验设计的eDNA微阵列检测了中药作用细胞后对细胞周期和损伤检测相关基因 转录的影响。五种中药作用SMMC一7721后，细胞周期基凶和损伤检测点基因均有不 同程度改变，部分基吲表达上凋，部分基因下调，这些和流式细胞术检测的结果是相 符合的。 I—J时本研究还对五种中药进行了初步的组合研究，通过设计正交抑制率试验获得 了四种比较有效的组合，利用eDNA微阵列检测药物组合作用的分子学机理，发现不 同组合作用后，基冈表达有不同变化，但也有一定的规律f另外还研究发现黄【亳是药 物组合中一种比较有效的成分，这些结果，为我们科学的研究中药提供了一定晌指导 意义。 关键词：肝癌；中药；筛选：细胞闵期；DNA微阵列；组合 卸f胞周期相关基闲微阵列的构建及其在中药筛选中的应用 Abstract Abstract‘ ofthemost disehsesin Asone prevailing China，Hepatocellular Chinese treat traditional hasbeena to HCC been longhistory by extensivelyinvestigated．It the the andobscure herhs limitaftonsof ingredients HCC．tlowever，with complex against to Chineseherbs ofChinese is difficult Recently、 effectmechanisms herbs，itvery study have of cancersherbs with of researchlev