绿僵菌几丁质酶的分离纯化及性质.pdfVIP

第 卷 第 期 化 工 学 报 ５６ ４ Ｖｏｌ．５６ Ｎｏ．４ 　 　 　 　 　　　 　　　 　　　 　　　 　　　　 　 年 月 （ ） ２００５ ４ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒ ａｎｄ Ｅｎｉｎｅｅｒｉｎ Ｃｈｉｎａ Ａ ｒｉｌ ２００５ 　 　 　 　 　 　 ｙ　 　 ｇ ｇ　 　 　 ｐ 　 檭 殐檭檭檭檭檭殐 檭 研究论文檭 绿僵菌几丁质酶的分离纯化及性质 殐 殐 檭 檭檭檭檭檭 杨 革，陈洪章，李佐虎 　 （中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京 １０００８０） 摘要：从自然罹病死亡的金龟子体内分离到一株金龟子绿僵菌 （ ），它在几丁质的诱导下 犕犲狋犪狉犺犻狕犻狌犿犪狀犻狊狅犾犻犪犲 狆 能产生较高活性的几丁质酶 发酵液经硫酸铵盐析、 纤维素柱层析、 ＴＭ 疏水 ． ＤＥＡＥ ＰｈｅｎｌＳｅｈａｒｏｓｅ ６ＦａｓｔＦｌｏｗ ｙ ｐ 柱层析等方法，得到电泳纯的几丁质酶 用 测得该酶相对分子质量为 ，而经质谱分析为 ． ＳＤＳＰＡＧＥ ６１．５ｋＤ 最适反应温度为 ，最适反应 值为 ，酶的等电点 为 ，其 末端序列为 ５７．１４ｋＤ． ５５℃ ｐＨ ６．０ ｐＩ ４．０２ Ｎ ＶＩＧＰＡＡ ＰＬ，用硫酸 酚法测得其含糖量为 水解几丁质的 为 · －１ 该酶在 ， 值  ５６．２％． 犓ｍ １４．５ ｍｏｌ Ｌ ． ４５℃ ｐＨ ３．０～ μ 较为稳定 ２＋ 、 ２＋ 、 ２＋ 和 ２＋ 离子对几丁质酶活性有明显的促进作用，而 ２＋ 、 ２＋ 和 ２＋ 离子 ９．５ ．Ｚｎ Ｃａ Ｂａ Ｍｎ Ｈｇ Ｃｏ Ｆｅ 完全抑制几丁质酶的活性 此酶还可被 所抑制，表明金属离子为其活性所必需 试剂对几丁质酶 ． ＥＤＴＡ ．ＰＭＳＦ 的活力影响比较大，丝氨酸可能是酶活力的必需基团． 关键词：金龟子绿僵菌；几丁质酶；分离纯化；酶学性质 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （