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第三章 色谱柱类型 分离的过程示意图 气固色谱 (GSC) 气液色谱 (GLC) 气液色谱 (GLC) 色谱过程示意图 柱分离指标 计算柱效 测量线速度和流量 柱效与载气线速度 最佳流量 评价柱效 如何提高柱效 分离度 缩短运行时间 使用快速 GC 快速色谱需考虑的因素 载气种类对柱效和分离度的影响 重整汽油 保留时间锁定 (RTL)软件 液相选择 柱选择方面的考虑 柱选择 应用举例说明： 液膜厚度与保留时间 提供的目录信息: 色谱柱保存 - 色谱柱老化 淋洗 色谱柱保存 柱温操作 柱补偿色谱 实验 常规 运行 空白 运行 柱 补偿 运行 学员应做下列实验： 实验 1: 计算柱效和分离度 实验 2: 色谱柱选择性 实验 3: 炉温操作与柱补偿 选项 实验 4: 保留时间锁定演示 Slide * 色谱柱 确认填充柱与毛细管柱的区别 计算柱效和分离度 介绍快速色谱 介绍保留时间锁定功能 理解柱的选择性 确认柱操作的步骤 学习炉温的恒温操作和程序升温操作 填充柱 开管柱(毛细管柱) 常规型 小球 填充柱 多孔层 小球 填充柱 常规填充 柱及微 填充柱 多孔层 开管柱 壁涂 开管柱 压力 (psi) 柱长（米） 内径 (mm) 流量 (ml/min) 样品负荷量 .5-10 2-4 10-60 10-90 100 ng/峰 5-100 .530 4-30 1-20 5-100 .3-.75 1-30 1-40 100 ng/峰 5-100 .05-.3 0.3-1.0 5-90 50 ng/峰 填充柱 530 系列柱 WCOT (粗径) WCOT (细径) 样品 流动 相 固定 相 占应用的10% 吸附型 填充柱 吸附填充 (GSC) 毛细管柱 - 多孔层开管柱 (PLOT) 载气 多孔层具有大的表面积 载气 分配填充 填充柱 载气 液体相 固体支撑物 非常多的孔具有极大的表面积 壁涂开管柱 (WCOT) 液体相 毛细管柱 (占应用的90%) “相似相溶 或 同极性相互作用 通过样品在固定相中的分配或不同溶解度实现分离 组分基于不同的极性而分离 (偶极力的作用) 通常 例如： 醇类是极性化合物 聚乙二醇(Carbowax)是极性固定相 A B C D 气流 柱效: 色谱柱形成尖锐峰的能力 分离度: 色谱柱将两个峰彼此分开的能力 选择性: 色谱柱确认两个峰化学与/或物理性质差别的能力 优 差 优 差 分析物 时间 进样 不保留组分 t m t R t R 我们希望知道组分保留在固定相中的真实 时间。 将 n与柱长相比： 或 每米塔板数 (N) = n L 每块理论塔板高度 (HETP) = n L 因此，柱效越高， “N”值越大， “HETP”值越小 n = 5.545 t R W h 2 t R - t m = t R t R t R R t = 调整保留时间 n = 有效理论塔板数 柱长 (cm) 不保留组分的保留时间 (sec) 线速度 = 估算不保留组分的保留时间 如果溶剂是流出的第一个组分，就使用它的保留时间。 也可从打火机中取 5cc丁烷气，使用丁烷峰的保留时间。 使用如下公式来估算柱长： Length = Pdk 其中 d = 柱卷成的圈的直径 k = 柱圈圈数 P = 3.14 使用下面的公式，可利用线速度计算流量 流量 (ml/min) = Pr2 m60其中 r = 柱半径 cm m = 平均线速度 cm/sec 60 = 从 sec 到 min 的转换因子 HETP C 传质阻力项 A 涡流项 分子扩散项 m ( opt m) } } B { HETP = A + + C m B m 柱效受载气线速度和流量影响。 曲线的最低点代表最小板高 HETP (或最大每米理论塔板数) 也就是最好的柱效。 毛细管柱中不存在“A”项。 HETP与线速度形成的曲线叫做范德姆特曲线。 曲线最低点的线速度值即为可获得最好柱效的最佳线速度值。 填充柱 毛细管柱 通常情况下，可使用下列推荐值来确定不同类型柱的最佳流量： 柱内径 载气最佳 流量 载气最佳 线速度 1/4 530系列柱 (大孔径) 0.320 mm ( 粗径) 0.200 mm (细径) 0.100 mm (快速) 1/8 3-5 ml/min 1-3 ml/min .5-1 ml/min .2-.5 ml/min 22 - 38 cm/sec 20 - 41 cm/sec 21 - 32 cm/sec 42 - 106 cm/sec 50-60 ml/min 20-30 ml/min 2.6