上课用动物细胞培养和核移植技术.pptVIP

P47最上面 1、大规模的生产生物制品。 2、培养的动物细胞作为基因工程的受体细胞。 3、检测判断物质的毒性。 4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于 等，为 及其他疾病提供理论依据。 整个过程用了哪些技术？ 细胞培养、核移植、胚胎移植 新生牛的性别、基因？ 与供体相同 繁殖方式？ 无性繁殖 原理？ 动物细胞核的全能性 阅读课本P50页 * 知识回顾 植物细胞工程 植物细胞工程技术 植物细胞工程应用 植 物 组 织 培 养 植 物 体 细 胞 杂 交 植 物 繁 殖 的 新 途 径 作 物 新 品 种 的 培 育 细 胞 产 物 的 工 厂 化 生 产 2.2 动物细胞工程 生产单克隆抗体等 动物细胞工程常用的技术 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 是其他动物细胞工程技术的基础。 为什么要进行动物细胞培养? 一.动物细胞培养 如何进行细胞培养? 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 从动物机体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 (一)概念 . 试说大致过程 为什么要把组织剪碎、用酶分解开？ 用什么酶？为什么？用胃蛋白酶行不行？ 这两种酶会不会把细胞消化掉？（教材P44问题） 为什么要再分装？ 原代培养、传代培养？次数？ 培养得到的细胞，如果暂时不用时，怎么保存？ （二）动物细胞培养过程 阅读P44页回答问题 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 .培养条件 动物组织 分散成单个细胞 细胞悬液 培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 原理： 　　细胞增殖（有丝分裂） 结果： 　　细胞群，细胞产物 原代培养 传代培养 动物细胞培养过程 胚胎的细胞或刚出生不久动物的组织 (二) 动物细胞培养过程 胚胎或幼龄动物的组织器官 细胞悬液 10代细胞 50代细胞 剪碎 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 洗涤、稀释、分离 原代培养 用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶（2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。 比老龄动物的组织细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛。分化程度越低，繁殖能力越强，越容易培养。 动物细胞培养不能最终培养成生物体 细胞增殖缓慢，核型可能变化 动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 贴壁生长 接触抑制 10代以内，保持正常二倍体核型 传代培养 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考以下问题： 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ P46讨 论 充足营养（糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等合成成分及血清、血浆等天然成分。） 适宜温度、PH和气体环境；无菌无毒环境 1、无菌、无毒 消毒、灭菌 抗生素 定期更换培养液（清除代谢废物） 2、营养 合成培养基：糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素（血清、血浆） 3、温度和pH 36.5±0.5℃，7.2--7.4 4、气体 95%空气，5%CO2（维持培养液PH） .植物组织培养的条件；应用 （三）培养条件 （四）植物组织培养和动物细胞 培养的比较 细胞株、细胞系 植物体 培养结果 获得细胞或细胞分泌蛋白 快速繁殖、培育无病毒植株 培养目的 葡萄糖 动物血清 蔗糖 植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 细胞的全能性 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 (五) 动物细胞培养技术的应用 筛选抗癌药物 治疗和预防癌症 二.动物细胞核移植技术和克隆动物 将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物） 分 类 胚胎细胞核移植： 体细胞核移植： 细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性不容易 (一)、 动物细胞核移植概念： 母绵羊A 乳腺细胞（体细胞） 母绵羊B 未受精的卵细胞 母绵羊C “多莉” 新的卵细胞发育成早期胚胎 去核卵细胞 提取细胞核 核移植 胚胎移植 （二）体细胞核移植技术实例—克隆羊 (二)、体细胞核移植的过程： 请看教材P48图2-21 思考： 1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？用此细胞作为受体细胞有什么好处？ 2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？ MⅡ中期卵母细胞 诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成 细胞分裂和发育进程。 卵母细胞体积大，便于操作；含