生物制片显微绘图染色体和核型分析技术精要.pptVIP

生物实验技术 2010级硕士研究生 第一章 生物制片技术 石蜡制片法 一、石蜡制片法 石蜡制片法是生物学的基本实验技术之一。要完整的观察植（动）物的内部构造，必须先将实验样品制成显微标本片，许多植物药材用徒手切片或滑动切片法往往不易得到较薄且均匀的切片，因此，常采用石蜡切片法。 原理：将液体石蜡渗透到样品材料内部，待石蜡凝固成固体，再进行切片，所得切片薄而均匀，约厚4~5μm。有利于切片的长期保存和常规检查。 实验仪器、材料与试剂 实验仪器：石蜡切片机、切片刀、小木块（2.5×2×1.5cm）、解剖针、刀片、毛笔、酒精灯、培养箱、显微镜等。 实验材料：徐长卿根等 实验试剂：F.A.A.固定液、酒精、二甲苯、石蜡、甘油蛋白、番红染色剂、固绿（亮绿）染色剂等 实验步骤 取材 实验关键 1、取材：取材要有代表性，注意取材的时间、部位和方向。 2、固定：F.A.A.固定液（F=福尔马林：40%甲醛5ml；A=乙醇50%或70%90ml；A=冰醋酸5ml），固定时间：10~24h以上。 3、脱水（上行）：将材料用梯度乙醇（30%、40%、50%（可过夜）、60%、70%（可过夜）、80%、90%、100%）脱水至100%乙醇的过程。 4、透明：二甲苯（50%etoh+50%px、70%、100%、100%）透明至完全透明。 5、浸蜡：将液体石蜡（熔点：52~55℃）逐级浸入细胞中