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动物体细胞核移植技术和克隆动物1.ppt
知识回顾 英国计划生产人造皮肤 对比:动物细胞培养、植物组织培养 问题讨论 1、某植物非常具有观赏价值,你采取什么方法来繁殖后代,使它们继承该植物的全部优良性状? 2、1997年,美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛,年产奶量为30.8t,创造了世界奶牛产量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛,平均每年产量为十几吨,而我国平均水平仅有3-4吨。你能想办法繁殖卢辛达的后代,使年产奶量为30.8t吗? 克隆 1、什么是克隆 概念:将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称为克隆动物 1、动物的克隆与植物克隆一样吗? 4、动物克隆实例很多,为何多利就举世闻名呢? 4.动物克隆实例很多,为何多利就举世闻名呢? * * 无菌、无毒 消毒、灭菌、抗生素、定期更换培养液(清除代谢废物) 营养 合成培养基(血清、血浆) 温度和pH 36.5±0.5℃,7.2---7.4 气体 95%空气,5%CO2 动物组织 分散成单个细胞 细胞悬液 培养 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 原代培养 传代培养 动物细胞培养的结果:细胞群或细胞产物 众所周知,治疗烧伤需要做皮肤移植手术,这对烧伤病人来说可谓雪上加霜。他们本身已经够痛苦的了,还要进行皮肤移植,这意味着将从他们所剩无多的好皮肤上再移走一块。也就是说,这些已经受伤的患者,身上还要平添一处新的伤痕。 如今,英国一家公司在实验室中培育出人造皮肤,有望结束烧伤患者的皮肤移植之痛。 据英国《每日邮报》报道,小块的皮肤移植已经进入临床实验阶段。医生在6名志愿者的手臂上分别取下不足7平方厘米的皮肤,然后种上人造皮肤,用无菌的绷带包扎好。28天后,志愿者们的皮肤伤口全部愈合,几乎没留下什么疤痕,而且这些志愿者也没有任何排异反应,预后比较理想。 人造皮肤的厚度与真正的皮肤也是一致的,皮肤由纤维蛋白原、血凝酶和纤维原细胞等所合成的基质组成。在显微镜下,它们几乎无异于自然生长的皮肤,甚至可以清晰地看到纵横密布的血管。 . 脱分化 分散处理 结果 培养基 原理 动物细胞培养技术 植物组织培养技术 细胞全能性 细胞有丝分裂 固体,营养物质,激素 液体,营养物质,血清等 完整植株 细胞群或细胞产物 无 有 有 无 植物组织培养技术是植物细胞工程技术的基础。 动物细胞培养技术是动物细胞工程技术的基础。 复习植物细胞工程和动物细胞工程的部分内容。 “多利”的复活 人们利用克隆技术能够培植人体的皮肤进行植皮手术;能够“制造”出人的耳朵、软骨、肝脏和心脏等人体“配件”,一旦病人需要,就能重新“装配”…… 思考: 假如你会克隆,你想克隆什么? 2、以前学习过动物克隆的实例吗? 3、请简述多莉克隆的过程? 多莉羊 卵细胞 C母绵羊子宫 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 胚胎移植 早期胚胎 多利羊 分娩 卵裂 融合后的卵细胞 细胞拆合技术 妊娠 多莉羊的培育过程 核移植 (难度高) 受体细胞是减Ⅱ中期的卵母细胞 动物体细胞核移植技术和克隆动物 胚胎细胞核移植: 体细胞核移植: 细胞分化程度低,恢复全能性容易 2、用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么? 动物克隆过程的实际是细胞核移植 不一样 思考题 体细胞核移植的过程(以高产奶牛为例) 体细胞 培养 甲牛 乙牛 减2中期卵母细胞 去除核 去核卵母细胞 重组 细胞 卵裂 重组胚胎 代孕母牛丙 移植 体细胞群 克隆牛 细胞核移植 胚胎移植 物理或化学方法激活 体细胞 注入 细胞融合 请看教材P48图2-21 思考: 1.核移植的受体细胞是什么?处在什么时期?用此细胞作为受体细胞有什么好处? 2.通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎? 减2中期卵母细胞 诱导方法:物理或化学方法激活受体细胞,完成 细胞分裂和发育进程。 卵母细胞体积大,便于操作;含有营养物质丰富,提供早期胚胎发育所需的营养;含有激活细胞核体现全能性的物质。 供体细胞(供核) 细胞培养 体细胞 卵巢卵母细胞(减Ⅱ中期:供质) 去核 无核卵母细胞 注入 细胞融合 重组细胞 重组胚胎 胚胎移植 代孕母体 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 归纳: 1.共分成两大阶段:核移植和胚胎移植 2.取卵细胞作受体细胞的原因是:它是最大的细胞,易操作,它发育可直接表达性状 3.严格来说新个体有卵巢母细胞的细胞质有两个亲本的性状 细胞培养 1、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么? 思考题 2、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核? 3、用于核移植的供体细胞一般都
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