慢性脑低灌注状大鼠脑组织线粒体结构和功能改变及丁苯酞注射液对其影响.pdfVIP

中文摘要 慢性脑低灌注状态大鼠脑组织线粒体 结构和功能改变及丁苯酞注射液对其影响 摘 要 dementia 目的：血管性痴呆(vascularVD)已经成为中老 年人群中的常见病、多发病。VD突出的临床特点是学习、 记忆等认知功能下降，伴或不伴神经功能缺损的症状和体 征。目前，血管性痴呆的发病机制尚未完全明确，治疗也仍 以控制病情、对症治疗、加强护理为主，尚无特殊有效的根 治方法。因此，探索VD的发病机理，制定合理的治疗方案， 是医学领域研究的重要课题。VD病因之一可能与慢性低灌 注状态所造成的脑缺血缺氧有关。所谓慢性脑低灌注状态是 高血压、脑动脉硬化引起的脑动脉狭窄所致的脑组织长期低 于生理阈值而出现的慢性缺血性神经系统损害的一种病理 disease 状态，是VD、AD(Alzheimer’S 等多种疾病发展过程中的一个共同病理过程。 大量研究表明，在低灌注状态及低代谢状态下认知功能 可发生减退，而脑部自由基代谢的紊乱是低灌注时产生脑实 质和脑微血管系统损害的重要的可能机制。线粒体既是机体 产生氧自由基的主要细胞器，又是细胞进行能量代谢的主要 场所。线粒体内部结构是氧自由基损伤的首要目标。因此， 线粒体结构和功能的异常可能在VD的发病过程中起关键 性作用。 近年来，临床上有关使用丁基苯酞对脑缺血具有神经保 中文摘要 d1．NBP、)是源于天然的化学合成药物，药理学实验表明有良好 的抗脑缺血和脑保护作用，尤其是对急性局灶性缺血后脑神 经元线粒体形态和功能具有保护作用。目前，有关丁基苯酞 神经保护作用的大部分研究都集中在急性缺血模型，有关作 用于慢性脑低灌注模型的实验研究报道尚缺乏。本实验通过 能较好模拟人类慢性脑低灌注的结扎大鼠双侧颈总动脉的 动物模型，通过水迷宫试验测试大鼠学习记忆受损情况，行 透射电镜观察线粒体形态变化，用分光光度法测定大鼠脑线 dismutase 粒体ATP酶活性，超氧化物岐化酶(superoxide SOD)活性，丙二醛(malondialdehydeMDA)含量，并探 讨丁苯酞注射对其影响的药理机制，以期能为临床治疗血管 性认知功能障碍提供一个新思路。 方法：用雄性SD大鼠55只，月龄3．-一4个月，起始体 液低剂量组(n=15)。每组大鼠行双侧颈总动脉永久结扎术，假 手术组大鼠除不结扎双侧颈总动脉外，余处理同生理盐水组 和丁苯酞注射液组。丁苯酞注射液高剂量组手术第4周后腹 腔注射丁苯酞注射液，(剂量6mg／kg)，每日二次。丁苯酞 注射液低剂量组手术第4周后腹腔注射丁苯酞注射液，(剂 量2mg／kg)，每日二次。生理盐水组腹腔注射等剂量生理盐 水，假手术组不给药，连续给予四周。各组大鼠在水迷宫测 试后，随机各取2只，1％的戊巴比妥钠麻醉后，立即断头在 mm， 冰盘上快速取脑，，取一侧颞叶皮层约lmm×lmm×2 放入磷酸缓冲的4％戊二醛溶液固定，1％锇酸中后固定，脱 中文摘要 水透明，环氧树脂包埋，超薄切片，电镜观察、照相。末次 给药后，动物均禁食12h，断头，在冰盘上快速取脑，提取 线粒体，并悬浮于EDTA．蔗糖Tris—HCl缓冲液中。考马斯 亮蓝法测定蛋白浓度。调节蛋白含量至lmg／ml。分别测定 13．0统计软件进行单因素方差分析，采用LSD．t检验进行各 组间的两两比较，P0．05表示有统计学意义。 结果：(1)各组大鼠存活情况：假手术组死亡0只，生理 盐水组死亡5只，死亡率为33．3％。丁苯酞注射液低剂量组、 丁苯酞注射液高剂量组分别死亡4只、5只，死亡率分别为 26．7％和33．3％。各组存活大鼠作为研究对象。(2)水迷宫 试验：生理盐水组大鼠学习、记忆成绩显著下降，表现为寻 找平台潜伏期时间延长，明显高于假手术组(p0．05)。