消渴丸对人血管皮细胞生长和功能的影响.pdfVIP

中文摘要 背景 消渴丸成品药包括中药成分：黄芪、生地黄、天花粉、葛根、五味子、山药、 玉米须；以及西药成分：格列本脲。二者之间有很好的定量关系。从西医的角度 来看，消渴丸中定量的格列本脲有良好的降低血糖的作用，从而减轻了糖毒性作 用，保护了胰岛功能；从中医角度上看，消渴丸具有滋阴补肾、益气生津等功效。 既往研究表明，消渴丸对糖尿病治疗有较好的作用，对糖尿病各种并发症的预防 及治疗也有一定意义。但到目前为止，有关消渴丸防治糖尿病及其并发症作用机 制的研究还不够充分。为此，进一步对消渴丸的作用机制加以研究实属必要。血 管内皮紊乱是糖尿病相关并发症发生和发展的关键一步，因此，选取血管内皮细 胞作为研究对象来研究消渴丸对内皮细胞生长和功能的影响，可以为探讨消渴丸 可能的保护机制提供方向。 目的 实验第一部分，摸索并总结合适的人脐静脉内皮细胞提取和培养方法，为接 下来的药物实验提供研究对象。实验第二部分，通过体外细胞培养，采取直接添 加药物的方法，观测消渴丸对人血管内皮细胞功能的影响，以及消渴丸中药成分 对内皮细胞增殖的作用，以探讨消渴丸对人血管内皮细胞的保护作用及其可能的 机制，为进一步研究消渴丸的药理作用作铺垫。 方法 原代培养获取人脐静脉内皮细胞，选取第3代细胞，接种于24孔板中，待 细胞贴壁后，进行药物干预试验：分成3个浓度组，根据格列本脲浓度依次为 消渴丸纯中药成分组和空白对照组，每个组样本量为8。继续培养24h，显微镜 下观察细胞生长状态，并吸取细胞培养液分别测定NO含量。消渴丸对内皮细胞 增殖的影响试验：制备第3代人脐静脉内皮细胞悬液，分成四个组，每组8孔， 10— l×105个细胞／孔。a空白对照组，b消渴丸中药成分粗提液低浓度组(2X 提液高浓度组(2×10—49／m1)，培养1，3，5天后分别进行细胞计数。所得数据 4 采用软件SPSSl7．0进行分析，组与组之间均选择t检验。 结果 初步研究显示。三个浓度下，消渴丸成品组和消渴丸纯中药成分组NO含量 相对于格列本脲组和空白对照组均明显升高(P0．001)，消渴丸成品组与消渴丸 纯中药成分组相比，NO含量无明显差别(P加．05)，并且随着药物浓度的递增， NO含量也明显上升(P0．05)。消渴丸对内皮细胞增殖的影响试验发现：与空自 对照组相比较，高剂量的消渴丸中药成分粗提液对血管内皮细胞有抑制其生长的 作用，且差异具有统计学意义(P如．05)。 结论 消渴丸在体外细胞培养环境中，可以提高NO的含量，而且随着药物浓度的 递增，NO浓度也随之增加，并且发现，这主要是来自消渴丸的中药成分的作用。 这可能是消渴丸保护血管内皮的一种机制。另外，高剂量的消渴丸中药成分粗提 液对血管内皮细胞有抑制其生长的作用，且差异具有统计学意义(P0．05)。 关键词 人脐静脉内皮细胞，格列本脲，消渴丸成品，消渴丸纯中药成分，内皮功能， 一氧化氮 5 Abstract Objective To theeffectofachil麟triditional is called investigate medicine。which “Xiaokewan一，011thereleaseofnitricoxide(NO)inculmreendothelialcell‰ humanumbilicalvein·Andtheeffectofthismedicineonthe ofhuman proliferation umbilicalvein endothelialcells(HIⅣ．ECs)w躯alsostudied。 Metho由 HUVECs,w讹isolated ofcultured bycollagenasedi