2012年《高考风向标》高考生物一轮复习 课件：选修1·专题3、5 植物的组织培养技术、DNA 和蛋白质技术 配套课件.pptVIP

* 专题 3、5 植物的组织培养技术、 DNA 和蛋白质技术 本专题内容单独出题几率 不大，多分拆于必修的相关 内容中，多以选择题形式出 现 1. 植物的组织培养 2．蛋白质的提取和分离 3．PCR 技术的基本操作和应用 4．DNA 的粗提取与鉴定 命题展望 考纲内容 一、植物的组织培养技术 1．菊花的组织培养 (1)理论基础：植物细胞的①_______。 (2)基本过程 外植体→愈伤组织→长出丛芽→生根→移栽 (3)实验操作步骤 制 备 MS 培 养 基 → 外 植 体 消 毒 →②_____→ 培 养 →③_____→栽培 接种 移栽 全能性 2．月季的花药培养 (1)理论基础：花粉具有④____ __。 (2) 花粉发育过程：⑤__________、⑥________、⑦_____ 等阶段。 四分体时期 单核期 双核期 (3)产生花粉植株的两种途径： 1)花粉→胚状体→丛芽→生根→移栽。 2)花粉→愈伤组织→丛芽→生根→移栽。 全能性 二、DNA 和蛋白质技术 1．血红蛋白的提取和分离 相对分子质量的 (1)凝胶色谱法：也称分配色谱法，是根据⑧______________ ___分离蛋白质的方法。相对分子质量较小的移动速度较慢，而 相对分子质量较大的无法⑨_____________，移动速度较快。 (2)缓冲溶液 能够抵制外界的⑩________对溶液 pH 的影响，维持 pH? _________。 酸和碱 基本不变 大小 进入凝胶内部 (3)电泳 带电粒子在? 的作用下发生迁移的过程。 电场 (4)实验操作 1)样品处理及粗分离 红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液→透 析 2)凝胶色谱柱操作 凝胶色谱柱的制作→? →样品的加入 和洗脱 凝胶色谱柱的填装 3)纯度鉴定 用 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2．多聚酶链式反应扩增 DNA 片段 (1)PCR 原理 DNA 模板 在一定的缓冲溶液中提供? 链 结 合 的 两 种 引 物 、 ? 、分别与两条模板 、 ，同时控制温度使 DNA 复制在? ? 反复进行。 (2)PCR 的反应过程：变性→? →延伸。 四种脱氧核苷酸 耐热的 DNA 聚合酶 体外 复性 DNA 的粗提取与鉴定 1．实验原理 (1)DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同，其变化 曲线为： 图 1－3－1 (2)DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的其他某些物质可以溶 于酒精溶液，据此可提取含杂质较少的 DNA。 ―― (3)DNA＋二苯胺 → 蓝色(用于 DNA 的鉴定)。 沸水 浴 2．实验流程 3．实验关键 (1) 取材不用哺乳动物的血细胞( 由于成熟红细胞无细胞 核)。 (2)获取 DNA 时要向鸡血细胞液加入足量的蒸馏水，以便 使细胞膜和核膜破裂，把核内物质释放出来。 (3)实验中有 6 次搅拌，除最后一次搅拌外，前 5 次搅拌均 要朝一个方向。并且，在析出 DNA、DNA 再溶解和提取中， 各步骤搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，防止 DNA 分 子断裂。 (4) 2 次加蒸馏水 ①第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂(注：植物 细胞是用洗涤剂溶解细胞膜)，使血细胞充分破裂。 ②第二次加蒸馏水是为了稀释 NaCl 溶液，析出 DNA。 (5)2 个浓度的 NaCl 溶液 ①一个是 2mol/L NaCl，为了溶解 DNA，使 DNA 与蛋白 质分离。 ②一个是 0.14mol/L NaCl，为了析出 DNA。 (6)DNA 易吸附在玻璃容器上，所以实验中最好使用塑料烧 杯、试管、容器，以减少 DNA 的损失。 4．去除滤液中的杂质的其他方案 (1)方案一：用嫩肉粉(蛋白酶)，它能水解蛋白质，但对 DNA 没有影响。 (2)方案二：加热至 60℃～75℃，大多数蛋白质不能忍受 60℃～75℃的高温而变性，但 DNA 不变性。 【易错易混】预冷的酒精溶液具有的优点 ①抑制核酸水解酶活性，防止 DNA 降解。 ②降低分子运动易于形成沉淀析出。 ③低温有利于增加 DNA 分子柔韧性，减少断裂。 【突破题 1】下列关于 DNA 粗提取与鉴定的说法中，正确 的是( ) A.析出 DNA 时要缓慢地加蒸馏水，当析出黏稠物时即不 再加水 B.在探究洗涤剂对植物细胞 DNA 提取的影响实验中，自 变量是洗涤剂和食盐 C.提取的 DNA 溶解后加入二苯胺试剂即可染成蓝色 D.将含有