柱层析 第七组.pptVIP

陈雪燕 陈湘 罗芳芳 张洁娣 曹静怡 郑立君 * 层析的原理 固定相 固定相是层析的一个基质。它可以是固体物质（如吸附剂、凝胶、离子交换剂等），也可以是液体物质（如固定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换等作用。 固定相对层析的效果起着关键的作用。 * 流动相 在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体等，都称为流动相。 柱层析中一般称为洗脱剂 薄层层析时称为展层剂。 * 按操作形式不同分类 名称 操作形式 纸层析法 用滤纸作液体的载体，点样后用流动相展开，使各组份分离 薄膜层析法 将适当的高分子有机吸附剂制成薄膜，以类似纸层析方法进行物质的分离 薄层层析法 将适当粘度的固定相均匀涂铺在薄板上，点样后用流动相展开，使各组份分离 柱层析法 固定相装于柱内，使样品沿着一个方向前移而达分离 * 柱层析的基本操作 ⑴ 装柱 ⑵ 平衡 ⑶ 加样 ⑷ 洗脱 ⑸ 收集、鉴定及保存 ⑹ 基质（吸附剂、交换树脂或凝胶等）的再生 * ⑴ 装柱 将层析用的基质（如吸附剂、树脂、凝胶等）在适当的溶剂或缓冲液中溶胀，并用适当浓度的酸（0.5N~1N）、碱（0.5N~1N）、盐（0.5M~1M）溶液洗涤处理，以除去其表面可能吸附的杂质。 根据层析的基质和分离目的选好柱子。一般柱子的直径与长度比为1:10~50；凝胶柱可以选1:10