肺通络解毒法对小鼠Lewis肺癌P53与C-myc蛋白分子表达的影响.pdf

中文摘要 目的 肺癌是当今各国最常见的恶性肿瘤。是目前对人类健康和生命威胁最 大的常见病，发病率和死亡率在癌症中居首位。防治肺癌已成为人们迫切 的愿望和国际医学界重点研究的课题。邱幸凡教授以其独特的理论见解和 丰富的临床经验，提出肺癌发生机理为“肺虚络痹毒结，其治疗方法为 “补肺通络解毒’’。本研究以中医基础理论为依据、结合现代中医学研究 成果及我们的临床工作经验，深入探讨肺癌发生的中医机理，并通过实验 研究观察补肺通络解毒方对小鼠LewiS肺癌生活质量、组织形态学、血液 流变学、p53蛋白和c-myc蛋白的影响，探讨其作用机制，以指导临床治 疗，改善患者生活质量，提高肺癌治愈率。 理论探讨 肺癌属于中医“肺积”、“患贲等疾病的范畴。《圣惠方》载有治疗 息贲上气咳嗽、喘促咳嗽、结聚胀痛、腹胁胀痛、咳嗽见血、痰粘不利、 坐卧不安、胸膈壅闷、食少乏力、咳嗽胸痛、呕吐痰涎、面黄体瘦等症状 的方药，其所治之症类似于肺癌症状。进一步明确其发病机理，对应用中 医药防治肺癌提供理论依据，具有一定的指导意义。故本文从整体观念和 “肺虚络痹毒结理论出发，结合现代中医学研究成果及我们在临床工作 中治疗本病的体会，我们认为，肺癌患者，体内正邪相争的态势与病情起 伏和预后呈正相关。而其中正气的强弱则是决定肺癌的发生、发展和预后 的根本，扶正培本是中医治疗肺癌的重要法则；血气不足，则络脉无以充 盈，血行不畅，肺气壅遏，肺失宣降，寒热痰瘀邪毒相裹痹窒肺络；因此 在肺虚基础上，络脉痹阻促进了肺癌的形成；癌症是由于“毒根深藏于 体内造成的，此种毒非外感六淫之毒、虫兽之毒，亦异于疫疠毒气，它具 有暴戾性、顽固性、多发性、内损性和依附性，发病凶险、怪异、难治。 因此，癌毒的产生是肺癌形成的关键。综上所述，本病发病机理可归结为， 肺气亏虚，体内外邪气入侵，肺气失调，凝痰、瘀血、热毒胶结于肺络变 生癌毒，在此基础上，邱师提出治疗法则为“补肺通络解毒。经过多年 肺癌治疗的临床观察，依此法则加减，可取得较好疗效。 实验研究 方法 s肺癌荷瘤小鼠模型，观察补肺通络解毒方高、低二个剂量 建立Lewi 组和环磷酰胺组对肿瘤的抑制情况。通过观察各组小鼠饮食活动情况和毛 发色泽变化及体重的改变，分析补肺通络解毒和环磷酰胺对荷瘤小鼠生存 质量的影响；通过全自动血粘度仪检测血流变学指标，分析补肺通络解毒 和环磷酰胺对荷瘤小鼠血流变学的影响；通过HE染色观察肺癌组织形态 学变化、电镜观察肺癌组织超微结构，流式细胞仪检测荷瘤小鼠凋亡细胞 及细胞周期阻滞，分析补肺通络解毒方和环磷酰胺对荷瘤小鼠凋亡周期的 影响；通过应用免疫组化检测肺癌细胞p53和c-myc蛋白表达，分析补肺 通络解毒方和环磷酰胺对肿瘤相关基因蛋白的影响。 结果 1．补肺通络解毒方高、低剂量组和环磷酰胺组的抑瘤率分别达21％、 35％和46．9％，高低剂量组之间有明显的量效关系，其中低剂量组较模型 组有显著性差异(PO．05)；环磷酰胺组较模型组有非常显著性差异 (尺0．01)。 2．恶性肿瘤和环磷酰胺化疗均可使小鼠饮食活动情况下降，毛发暗 淡脱落，体重减轻，而补肺通络解毒方却可减轻肿瘤对机体的损伤。模型 组、中药组之间鼠重比较没有统计学意义(D0．05)，而分别与环磷酰胺组 比较均有非常显著性差异(尺o．01)；模型组鼠重较正常组明显减轻，具显 著性差异(PO．05)。 3．补肺通络解毒方低剂量组全血粘度、血浆粘度、红细胞压积、红 细胞聚积指数与模型组比较均有非常显著性差异(尺0．01)。 4．小鼠肺癌组织光、电镜下观察符合癌细胞病理改变，补肺通络解 毒方高、低剂量组和环磷酰胺组治疗后均有明显改善。 II 5．补肺通络解毒方高、低剂量组，G。／G。细胞比例明显高于模型组(尺O． 01)，尤以补肺通络解毒方低剂量组上升明显。同时实验结果显示，补肺通 络解毒方高、低剂量组及环磷酰胺组LewiS小鼠肺癌细胞凋亡率均高于模 型组，有非常显著性差异(尺0．01)，其中补肺通络解毒方低剂量组凋亡率 高于环磷酰胺组，有显著性差异(尺O．05)，而补肺通络解毒方高剂量组凋 亡率低于环磷酰胺组，有显著性差异(尺O．05)。 一 6．小鼠Lewi S肺癌组织中的p53蛋白表达明显高