动物细胞工程高三生物一轮复习资料.ppt

2.2 动物细胞工程 植物细胞工程常用的技术 动物细胞工程常用的技术 概念：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基上, 让这些细胞生长和增殖。 （二）动物细胞培养的条件： 1.无菌无毒的环境 无菌操作并加抗生素 2.营养 葡萄糖，氨基酸，无机盐，微量元素，动物血清 3.温度和PH 与哺乳动物体温接近，PH为7.2-7.4 4.气体环境 O2和CO2 （三）动物细胞培养的应用 生物制品：培养杂交瘤细胞获得病毒疫苗，干扰素，单克隆抗体等生物制品。 检测有毒物质：有毒物质可以引起培养动物细胞畸形或病变。 理论研究：通过培养正常或各种病变细胞进行生理，病理，药理等方面的研究 植物组织培养和动物细胞培养的比较 二.动物体细胞核移植和克隆动物 （一）核移植：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，使这个新的胚胎最终发育成为动物个体。 （二）克隆动物：用核移植技术得到的动物。 克隆：通过无性生殖而产生的具有完全相同的遗传组成的一群细胞或生物的个体，克隆在希腊语中是“小树枝叶”的意思，用以指无性增殖动物，现在指个体，细胞，基因等不同水平上无性增殖动物。 1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？ （三）体细胞核移植技术的应用 三.动物细胞融合 原理：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝集，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活：用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 概念：指两个或多个动物细胞结合成一个细胞的过程。 结果:单核的杂交细胞。 原理：细胞膜的流动性。 诱导的方法：物理法：离心，振动，电激 化学法：PEG 灭活的病毒 四.单克隆抗体 3.一个大胆的猜想： 将能够产生特定抗体的B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。 细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。人淋巴细胞有这两种途径，但一般不分裂增殖。骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，而后在培养液中加氨基喋呤。 通过恰当的稀释达到分离单个细胞进行培养的目的。 （1）取出阳性孔的细胞数进行计数 （2）用培养液将其稀释到10Cell／ml （3）如果在多孔板，每孔加0.1ml，其几率为每孔内落入一个细胞 （4）根据检测的阳性结果可进行克隆化 4.单抗的制备过程： 1.抗原的制备 2.免疫动物 3.免疫脾细胞和骨髓瘤细胞 4.细胞融合 5.杂交瘤细胞的选择培养 6.杂交瘤细胞的筛选 7.杂交瘤细胞的克隆化 8.单克隆抗体的检定 9.分泌单克隆杂交瘤细胞系的建立 10.单克隆抗体的大量制备 5.单克隆抗体的概念： 由单个B淋巴细胞进行无性生殖形成的细胞群，产生的化学性质单一，特异性强的抗体。 五.单克隆抗体的应用 1.作为诊断试剂 准确，简易，高效，快速 2.用于治疗疾病和运载药物 甲胎蛋白（AFP）是一种特异性较强的肿瘤标志物，用甲胎蛋白作为抗原免疫小鼠，制备抗AFP单抗，并与含有放射性同位素的标记物连接，单克隆抗体携带放射性标记物通过全身血液循环运送到所有组织，由于肿瘤细胞表面的AFP会和单克隆抗体特异性结合，所以放射性同位素标记物就不断积累在肿瘤上，通过一定的显影技术就可发现肿瘤所在。 生物导弹：用癌细胞作为抗原，免疫小鼠制备抗癌细胞的单克隆抗体，并与抗癌药物连接，便制成了生物导弹，注入患者体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了药剂用量。 （2011.14）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是 A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒 D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育 （2012）22. 下列事实能体现细胞全能性的是 A. 棉花根尖细胞经诱导形成幼苗 B. 单细胞的DNA 在体外大量扩增 C. 动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体 D. 小鼠体细胞经诱导培育成小鼠 用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体制备成“早早孕诊断试剂”。 受精后不久，胎盘滋养层细胞会分泌人绒毛膜促性腺激素（HCG)，是由受孕妇女体内胎盘产生的一种糖蛋白类激素，在妇女的尿液中大量存在，而非妊娠妇女尿液中几乎没有。 早孕试纸利用抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体为配体，固定在层析住上，以胶体金为指示标记，检测尿液中HCG浓度，来确定妇女是否怀孕。 阳性：出现