鹿茸草中苯乙醇苷类化学成分的心肌保护作用的研究.pdfVIP

鹿茸草中苯乙醇苷类化学成分的心肌保护作用研究 中文摘要 鹿茸草中苯乙醇苷类化学成分的心肌保护作用研究 中文摘要 目的：探讨鹿茸草中苯乙醇苷类化学成分的心肌保护作用。 方法：体外采用 DPPH 法检测苯乙醇苷类化学成分清除自由基的能力；采用 Na S O 致H9c2 大鼠心肌细胞缺氧缺糖实验考察苯乙醇苷类化学成分对心肌细胞存 2 2 4 活率的影响；采用 H O 致 H9c2 大鼠心肌细胞氧化应激实验考察苯乙醇苷类化学成 2 2 分对心肌细胞存活率、心肌细胞形态及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌细胞丙 二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。体内采用垂体后叶素(pituitrin, Pit)舌下静脉注射方法，制备大鼠心肌缺血模型，记录各时间点大鼠心电图变化情况； 采用异丙肾上腺素(Isoproterenol, Iso)致大鼠心肌缺血模型，记录各时间点大鼠心电图 变化情况，光镜观察心肌组织病理学改变，测定血清中LDH 的活性；采用结扎冠状 动脉左前降支的方法，制备大鼠心肌缺血模型，测定血清中LDH 、磷酸肌酸激酶(CK) 和SOD 的活性，MDA 和谷胱甘肽(GSH) 的含量，TTC 染色测定大鼠心肌梗死面积。 结果：在体外，苯乙醇苷提取物(TPG) ( 15.625-500 μg/ml)显著提高DPPH 自由基 的清除率(14.61±0.76%-92.79±0.54%) ；Na S O (4 mM)处理心肌细胞6 h 后，细胞存活 2 2 4 率为 (62.71±2.42%) ，TPG( 18.75-600 μg/ml) 能明显提高心肌细胞存活率 (64.60±1.91%-82.46±2.22%) ；H O (200 μM) 处理心肌细胞 24 h 后，细胞存活率为 2 2 (62.48±0.79%) ，形态学观察发现，细胞出现伪足回缩，细胞体积变小，坏死脱落等现 象，生化指标检测表明，细胞培养液中LDH 活性增高，细胞内SOD 活性降低、MDA 的生成 增多，而 TPG( 18.75-600 μg/ml) 可以明显提高细胞存活率 (64.01±1.76%-86.73±3.62%) ，TPG(25, 100, 400 μg/ml)可以剂量依赖性的改善受损的细 胞形态、降低培养液中LDH 的活性、减少细胞MDA 的生成、增加细胞SOD 的活 性。在体内，Pit 可以引起T 波的异常抬高，TPG(45, 90, 180 mg/kg)能够不同程度地 抑制T 波的改变；Iso 可引起T 波的异常抬高，大鼠心肌组织出现纤维断裂、变性坏 死，坏死处心肌细胞肌浆溶解，局部有炎性细胞浸润等现象，血清中LDH 活性升高， TPG(45, 90, 180 mg/kg)能够不同程度地抑制T 波的改变，对Iso 所引起的心肌组织的 I 中文摘要 鹿茸草中苯乙醇苷类化学成分的心肌保护作用研究 病变有所改善，降低血清中LDH 活性；大鼠经冠状动脉结扎致心肌缺血24 h 后，血 清中LDH 、CK 的活性、MDA 含量增加以及SOD 活性、GSH 含量降低，TPG(45, 90, 180 mg/kg)能降低心肌梗死面积和降低血液中LDH 、CK 的活性、MDA 的含量，增 加SOD 的活性、GSH 的含量。 在体外实验中，acteoside、torenoside B 、isoacteoside、savatiside A 四个单体在浓 度为 3.125- 100 μg/ml 时，DPPH 的清除率分别为 2.23±1.87%-90.34±0.13% 、 4.23±1.24%-82.77±2.65% 、1.77±0.99%-85.05±2.45% 、1.23±0.54%-51.39±1.92% ；与 Na S O 损伤心肌细胞 相比四个单体可分别提高细胞的存活率到 2