褪黑素对大鼠重急性胰腺炎肾脏损伤的保护作用及机制研究.pdfVIP

川删『f『『If『『fffflfI川㈣II|f|l||JJ¨ Y178466 腺炎肾脏损伤的保护作用及机制研究 摘 要 目的：观察重症急性胰腺炎大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)， 炎(SAP)相关肾脏损伤的保护作用及相关机制。方法：雌性SD大鼠90只， ／妇的剂量经腹腔注射麻醉。常规消毒，铺巾，在无菌操作下做上腹正中 切口3cm左右，打开腹腔，找到胃十二指肠交界处，再向下寻找到胰胆管 十二指肠开口处。用丝线结扎(活结)近肝门处胰胆管，用4．5号头皮针于 十二指肠乳头附近经十二指肠肠壁穿刺，逆行插入胰胆管，并在十二指肠 乳头处用手指捏住胰管末端。按lml／kg将5％牛磺胆酸钠逆行匀速推注至 胰管中(O．2ml／min)，使整个胰胆管均匀隆起。退出针头，即用手压迫进针 处约3～5min，然后去除结扎线，关腹，并同时开始计时观察。正常对照 组开腹后翻动肠壁即关腹。褪黑素组在术后10分钟用褪黑素溶液于大鼠背 水乙醇溶解，再用生理盐水稀释，使乙醇的终浓度为l％。模型组大鼠采用 同样方法给予等量的1％乙醇溶液。用全自动生化分析仪测定大鼠血清淀粉 位末端标记法(TI帆L)检测肾脏细胞凋亡率。结果：1．胰腺的病理改变： 正常对照组大鼠胰腺组织大体所见未见明显病变。SAP造模组大鼠胰胆管 逆行注入5％牛磺胆酸钠后，胰管周围胰腺组织颜色立即变红，并逐渐扩展、 加深。SAP造模12H后再次剖腹发现胰腺颜色紫暗，充血水肿明显，可见局 部坏死及出血，腹水明显，呈淡红色。褪黑素组大鼠12H后剖腹见胰腺颜 色变暗，充血水肿，但较模型组程度轻，未见明显坏死、出血，有少量腹 水。SAP造模24H后，剖腹可见腹腔内大量淡红色腹水，胰腺与周围脏器粘 连严重，表面可见多处出血点及坏死灶。褪黑素24H干预组剖腹观察，大 鼠腹腔内可见腹水，胰腺与周围组织轻度粘连，胰腺水肿，色泽紫暗，胰 腺及网膜组织多处皂化斑。SAP造模48H后，剖腹可见腹腔内大量血性腹水， 胰腺与周围脏器粘连严重，表面可见多处出血点、坏死灶及皂化斑。褪黑 素48H干预组剖腹观察，大鼠腹腔内可见腹水，肠管淤胀，胰腺与周围组 织轻度粘连，胰腺水肿，色泽紫暗，胰腺及网膜组织多处皂化斑。光镜下 观察：正常组胰腺组织结构完整，间质无炎细胞浸润。SAP模型12H组可见 胰腺叶间隔、小叶间隙、腺泡间隔增宽及少量炎细胞浸润；褪黑素12H干 预组胰腺小叶间隙增宽、少量炎细胞浸润，较胰腺炎组程度轻。SAP模型 24H组时胰腺损伤较显著，胰腺腺泡肿胀、出血、小叶内和小叶外周局灶 或片状坏死，间质可见较大量炎细胞浸润、部分腺叶正常结构消失。褪黑 素24H干预组胰腺间质疏松水肿，小叶小片状坏死，间质有炎细胞浸润， 小叶结构相对清晰。SAP模型48H组时胰腺损伤已经十分显著，表现为胰腺 腺泡极度肿胀、出血、小叶内和小叶外周局灶或片状坏死，间质可见大量 炎细胞浸润、部分腺叶正常结构消失。褪黑素48H干预组胰腺间质疏松水 肿，可见红细胞渗出、小叶小片状坏死，间质有炎细胞浸润，小叶结构相 对清晰。2．肾脏组织病理改变：正常对照组大鼠肾脏组织大体所见未见明 水肿加重，并可见少量出血点。48H时肾脏充血水肿严重，并可见大量出 血点。褪黑素干预组各时间点肾脏病理改变均较SAP组减轻。光镜观察结 果：正常对照组未见异常。各时点肾皮质、髓质结构清晰，肾小管、肾小 球结构正常。SAP组12H时肾小球轻度肿胀，肾小管肿胀较为明显，肾间质 见炎细胞浸润；24H时肾小球、肾小管肿胀加重，肾小管上皮细胞可见驴 死，肾间质炎细胞增多。48H时肾小球、肾小管肿胀严重，肾小球可见淤 血，肾小管上皮细胞可见坏死，肾间质大量炎细胞，可见管型。褪黑素干 预组各时间点光镜下所见病理改变均较SAP组减轻。3．生化指标：SAP造模 凋亡相关指标：SAP造模组各时间点Livin蛋白阳性率较正常组各相应时间 SOD、 MDA与肾功能损害的相关性分析结果：SOD与血清Cr呈负相关(F．O．916， SOD、MDA与凋