视网膜早基因cfos在豚鼠实验性近视眼中的表达及其对th调控作用的研究.pdfVIP

摘要 第一章豚鼠形党剥夺性近视动物模型的建立及眼球生长、屈光变化 过程的动态观察 目的：建立豚鼠形觉剥夺性近视动物模型，并对豚鼠形觉剥夺 性近视(Form—deprivationmyopiaFDM)形成及恢复期间遮盖眼及对照 眼屈光度和眼轴长度变化进行观察，了解豚鼠正视化和近视形成的过 程。方法：出生3周三色豚鼠40只，随机均分为4组：未遮盖组、单 眼遮盖l周组、单眼遮盖2周组、去遮盖组。对各组进行视网膜检影 和A超测眼轴，将各组屈光度及眼轴长度变化进行比较分析。结果： 未遮盖组：双眼呈基本正视状态，眼轴长度无统计学差异；遮盖1周 后遮盖眼呈中度近视(-4．5D)，自身对照眼呈轻度远视状态(+0．6D)， 双眼屈光度有统计学差异(P0．05)，眼轴较自身对照眼呈轻度延长 后遮盖眼呈高度近视(一8．8D)，而自身对照眼呈轻度远视状态 1周去遮盖眼较对照眼仍呈中度近视(．5．9D)，但去遮盖前后屈光度 无统计学差异(P0．05)，去遮盖眼眼轴较前无明显延长，甚至有缩 短趋势，但与自身对照眼眼轴有统计学差异(P0．05)。结论：形觉 剥夺能成功诱导豚鼠近视发生及发展，促进眼轴延长，而去除形觉剥 夺可抑制近视发展和眼轴延长。豚鼠不但是一种眼球结构及视觉发育 与人类相似、对形觉剥夺较敏感的动物，而且具有易于饲养，生长发育 快性情温顺配合检查，价格便宜并易于获得等优点，因此豚鼠将成为 一种比较理想的研究视觉系统的动物模型。 第二章 豚鼠形觉剥夺性近视模型中视网膜早基因c．fos、酪氨酸羟 化酶及多巴胺的动态表达 目的：通过建立豚鼠形觉剥夺性近视动物模型，观察豚鼠形觉剥夺性 FDM)形成及恢复过程中视网膜早基因 近视(Form—deprivationmyopia c．10s、酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺(DA)表达的动态变化，研究 豚鼠FDM中视网膜信号转导及抑制近视的可能分子机制。方法：分 别运用免疫组化和RT-PCR观察各组视网膜c．fos和TH蛋白及 mRNA表达变化规律：运用高效液相色谱法检测第一章中各组豚鼠视 网膜DA含量；对各组视网膜早基因c—fos、酪氨酸羟化酶(TH)、多 巴胺(DA)表达进行比较分析，并对视网膜酪氨酸羟化酶(TH)与 早基因(c—fos)mRNA表达量进行二元相关分析。结果：未遮盖组：双 眼视网膜均有c．fos、TH和DA表达，主要在视网膜无长突细胞层 与节细胞层表达，双眼c．fos、TH和DA表达无统计学差异(P0．05)； 遮盖1—2周组：遮盖眼视网膜c—fos、TH和DA表达明显下调，与 自身对照眼比较有统计学差异(P0．05)；去遮盖1周组：去遮盖眼 视网膜c．fos、TH和DA表达明显上调，与自身对照眼比较有统计 学差异(P0．05)。视网膜TH与c．10s之间表达具有高度相关性，相 关系数为0．805(P0．001)结论：形觉剥夺能明显抑制视网膜c．fos、 TH和DA的表达，而去除形觉剥夺诱导后视网膜c—fos、TH和DA 的表达上调，证明视网膜c．fos表达规律不仅与外界视觉环境对眼的 lI 刺激密切相关，而且与近视的发生、发展呈负相关关系，其可能参与 视网膜的信号转导和近视的抑制机制，而形觉剥夺性近视发展和恢复 过程中视网膜c．fos和TH表达的高度相关性证明了视网膜早基因 c．fos—TH—DA信号转导途径参与近视形成机制。 第三章早基因c．fos反义寡核苷酸诱导豚鼠实验性近视模型中视网 膜c．fos的表达及其对酪氨酸羟化酶的调控 目的：建立早基因c．fos反义寡核苷酸诱导豚鼠实验性近视动物 模型，观察早基因C—FOS反义寡核苷酸对豚鼠眼球发育及视网膜 重要作用，及其在视网膜信号转导及抑制近视的可能分子机制。方法： 3周三色豚鼠31只，随机均分为3组：高浓度寡核苷酸注射组(1nm01)、 低浓度寡核苷酸注射组(O．1nm01)及对照组。玻璃体注药前后分别 对各组进行视网膜检影和A超测眼轴，并分别运用免疫组化、RT-PCR 和高效液相色谱法观察各组视网膜c．fos、TH和DA的表达变化规律。 结果：高浓度和低浓度c．fos反义寡核苷酸注射眼均呈明显中度近视 反义寡核苷酸注射眼与自身c—fos正义寡核苷酸注射眼、