小球藻CvFad3基因在人乳腺癌细胞中的表达与作用.pdfVIP

小球藻{3vFad3基因在人乳腺癌细胞中的表达和作用 摘要 n 目的构建真核表达载体pEGFP…C33，检测小球藻n一3脂肪酸脱氢酶基因 CvFad3在人乳腺癌MCF-7细胞中的表达和作用。 为对照组。用RT-PCR法检Nd,球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3MCF-7细 胞中的表达；MTT法分析小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3对人乳腺癌 MCF-7细胞增殖的影响；用流式细胞仪检测转染后MCF-7细胞的细胞周期与 细胞凋亡；脂肪酸分析小球藻n-3脂肪酸脱氢酶基因CvFad3对人乳腺癌细 胞MCF一7细胞膜n一3多不饱和脂肪酸的影响，以及对n-6／n-3多聚不饱和脂 肪酸比例的影响。 流式细胞仪检测发现细胞周期被阻滞在G0／G1期；同时气相色谱检测分析 CvFad3基因增加了人乳腺癌细胞MCF-7细胞膜n一3多不饱和脂肪酸的含量， 降低了n-6多不饱和脂肪酸的含量，因此，降低了n-6／n-3多聚不饱和脂肪 酸的比例。 n 结论重组真核表达载体pEGFP…C33构建成功，小球藻n一3脂肪酸脱氢 酶基因CvFad3能在人乳腺癌MCF-7细胞内有效异源表达，且抑制了乳腺癌 饱和脂肪酸的比例。 关键词： 基因表达；小球藻；多饱和脂肪酸； MCF-7细胞 andeffectofChlorellaCvFad3inhuman Expression vulgaris gene breastcancercell ABSTRACT ectiveTo andeffectofn-3 aciddesaturaseCVFad3 obj investigateexpression fatty gene ofChlorellainbreastcancerMCF一7cells． vulgaris Methodsn．3 aciddesaturaseCvFad3ofChlorellaWascloned fatty gene vulgaris from Wasinserted ImPCRChlorella eDNAofthe into by vulgaris．The gene eukaryotic to vector formarecombinant．thentransfecteditintobreastcancer expressionpEGFP—C3 cell transfection Wassetascontrol MCF-7 by reagent．TheplasmidpEGFP—C3 group．The ofCvFad3wasdetectedRT．PCR：MTTWasusedtoexaminethe expression gene by pr01． was to andcell of iferationof usedexaminethecell cells；flowcytometry cycle apoptosis MCF一7cellswhichweretransfected：and Wasusedtodetectthe of