第七章RNA的转录合成.pptVIP

真核生物的RNA聚合酶及其转录 讲授：陈友 琼州学院生物科学与技术学院 7.4.1真核生物基因转录的特点 与原核基因的转录相比较，真核基因的转录具有以下特殊性： 转录单元为多顺反子 RNA聚合酶高度分工 多种蛋白质因子参与 顺式作用元件复杂 转录水平的调控以正调控为主 7.5 真核生物基因转录的启动子 真核生物的启动子 真核生物的三种RNA聚合酶，每一种都有自己的启动子类型。 RNA聚合酶Ⅰ的启动子 即 rRNA 基因的启动子，称Ⅰ类启动子。 Ⅰ类启动子分两部分：P159 －45 ～ ＋20 称为核心启动子，决定转录起始的位点； －156～－107 称为上游控制元件，影响转录的频率。 RNA聚合酶Ⅱ的启动子 P159 即 mRNA基因的启动子，称Ⅱ类启动子 1、转录起始位点（Inr）： 即转录起始位点，其碱基大多为 A 。 2、TATA 框（基本启动子）： 又称Hogness 框，由含有TATA 的6～7个核苷酸组成，保守序列为 TATA（A/T）A（A/T） 。 但TATA框的两侧富含G-C碱基对。 TATA 框位于－25 附近，精确决定转录起始位点。 其序列的完整与准确对维持启动子的功能是必需的。 3、CAAT 框：位于 －75 附近，保守序列为 GGNCAATCT。 头两个 G 非常重要，一但突变，转录效率大大下降。 4、GC 框： CAAT 框控制着转录起始的频率。 位于－110附近，以5 ′CCGCC 3′序列为特征。 5、增强子（enhancer）：能结合反式作用因子，决定基因的时间和空间特异性表达，增强启动子转录活性的DNA序列。 增强子作用特点： ⑴ 增强效应十分明显：使转录频率增加百倍或千倍。 ⑵ 增强效应与其所处的位置和取向无关： 增强子以5′→3′或 3′→5′排列对启动子都有作用。 ⑶ 大多为重复序列：长约50bp，适合与反式因子结合，内部常有一个核心序列，为增强效应所必需。 ⑷ 增强效应具有严密的组织和细胞特异性。 ⑸ 没有基因专一性。 ⑹ 许多增强子受外部信号的调控。 1 RNA聚合酶 Ⅲ 的启动子 P161 即 tRNA基因的启动子，称Ⅲ类启动子。 Ⅲ类启动子位于转录起始点上游、下游，称上游、下游启动子（内部启动子）。 Ⅲ类启动子包括：A盒、B盒 P247 A盒靠近5′方向； B盒 靠近3 ′方向 。 Ⅲ类启动子需要的转录因子包括： TF Ⅲ C、TF Ⅲ B、TF Ⅲ A，前两者是共同的，后者为5S rRNA基因转录所需。 1 1 1 1 转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。 反式作用因子：是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质。 　　大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，可通过另一基因的特异的顺式作用元件相互作用，从而激活另一基因的转录。这种调节蛋白称反式作用因子。 　 参与基因表达调控的因子, 它们与特异的靶基因的顺式元件结合起作用。 编码反式作用因子的基因与被反式作用因子调控的靶序列(基因)不在同一染色体上。 反式作用因子有两个重要的功能结构域:DNA结合结构域和转录活化结构域,它们是其发挥转录调控功能的必需结构。 反式作用因子可被诱导合成, 其活性也受多种因素的调节。 1 1 0 0 1 1 * * 7.4.2真核生物的RNA聚合酶 P156 种类 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 对鹅膏蕈碱 的反应 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA tRNA、snRNA 耐受 极敏感 中度敏感 转录产物 GCGC-CAAT-TATA-ATG AATAAA 切离加尾 真正终止点 修饰点 外显子 内含子 翻译起始 转录起始 TATA盒 CAAT盒 GC盒 增强子 真核生物RNApolⅡ的启动子 原核生物和真核生物 转录起始位点的结构差异 原核生物 真核生物 帽子结构 没有 有 起始核苷酸 嘌呤或嘧啶 嘌呤（A为主） 启动区范围 较小(＋1～－70) 较大 (＋1～－110) 上游序列 TTGACA CAAT、GC、增强子 图5-4 P155页 原核