山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒说明书.docVIP

山羊肿瘤坏死因子α（）ELISA本试剂仅供研究使用 远慕生物专业供应： 试验原理： TNF-α试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知TNF-α浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TNF-α和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TNF-α的浓度呈比例关系。 TNF-α kit is an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), which is known to be the standard sample of TNF-α concentration and the unknown concentration of the sample. At the same time, the TNF-α and biotin labeled antibodies were incubated at the same time. After washing, add the HRP labeled with affinity. After warming and washing, the removal of non binding enzyme binding, and then join the substrate A, B, and enzyme binding at the same time. Produce color. The depth of color and the concentration of TNF-α in the sample is proportional to the relationship. ? 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份（2-8℃保存） 96孔配置 48孔配置 配制 96/48山羊份酶标板 1块板（96T） 半块板（48T） 即用型 塑料膜板盖 1块 半块 即用型 标准品：80ng/ml 1瓶（0.6ml） 1瓶（0.3ml） 按说明书进行稀稀 空白对照 1瓶（1.0ml） 1瓶（0.5ml） 即用型 标准品稀释缓冲液 1瓶（5ml） 1瓶（2.5ml） 即用型 生物素标记的抗TNF-α抗体 1瓶（6ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 亲和链酶素-HRP 1瓶（10ml） 1瓶（5.0ml） 即用型 洗涤缓冲液 1瓶（20ml） 1瓶（10ml） 按说明书进行稀释 底物A 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 底物B 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 终止液 1瓶（6.0ml） 1瓶（3.0ml） 即用型 标本稀释液 1瓶（12ml） 1瓶（6.0ml） 即用型 ? 自备材料 1．? 2．? 5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 3．? ? 安全性 1．? A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 2．? 3．? ? 操作注意事项 1．? 2．? 3．? 4．? A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 5．? 6．? 7．? A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8．? 9．? ? 样品收集、处理及保存方法 1、? －－－－-1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、? －－－－-EDTA1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、? －－-1000g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、? －－－－-1000×g离心10分钟，取上清液 5、? －－－－－－-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 ? 试剂的准备 1．? 80 ng/ml （6号标准品） 原倍浓度不用稀释直接加入50ul。 40 ng/ml （5号标准品） 100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液 20 ng/ml （4号标准品） 100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液 10 ng/ml （3号标准品） 100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液 5.0 ng/ml （2号标准品） 100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液 2.5 ng/ml （1号标准品） 100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液 0 ng/ml （空白对照） 原始浓度不用稀释直接加入50ul。 ? 2．? 50×）的稀释：蒸馏