第十一章。色谱分析法(导论).pptVIP

* 第十一章 色谱分析法 第一节　色谱法分类 第三节　色谱法基本理论 第二节　色谱法分离过程和常用术语 概述 色谱法导学：学习要求 学习方法建议 导论 （Chromatography) 1.注意色谱法在仪器分析方法中的特殊性，是一种分离分析法，重在分离，可结合光、电化学等其它仪器分析手段检测。 2.以色谱流出曲线为核心掌握色谱分析的相关术语，塔板理论与速率理论是从不同的角度对色谱分离过程的解释，注意两种理论的侧重点和对分离条件的指导。 3.校正因子理解和应用是定量分析方法的关键。 学习方法建议 　　了解色谱法的分类、色谱流出曲线和有关术语，理解分离度的含义。掌握气相色谱法的基本原理，了解气相色谱仪的构造及色谱操作条件的选择，重点掌握气相色谱定性定量分析方法。掌握液相色谱法的基本原理，了解液相色谱仪的构造，液相色谱法的分类。掌握液相色谱分析方法的选择以及定性定量分析方法；了解HPLC的应用。 学习要求 概述（overview） 植物叶子 的萃取物 1903年俄国植物学家茨维特在研究植物叶子色素成分时最先创立。 植物色素的分离 纯石油醚 CaCO3细颗粒 Chromatography：希腊语中“chroma”=color; “graphein”=write 50年代后，发展最快：复杂组分分析发 展的要求导致大量新型色谱技术的发展。 仅1937-1972年15年中有12个 Nobel 奖是有关色谱研究的！ 逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字 虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。 固定相 流动相 色谱柱：装有固定相的管子 色谱法的简史 目前，应用广泛、联用技术等。 石油工业的高速发展，得益于气相色谱技术的广泛应用。 色谱分析法的重要意义 在生命科学、环境科学、农业、能源、材料等领域研究中占有十分重要的地位。 人类基因组计划中的基因图谱的测定－ (色质谱联用等) 环境毒物的迁移、归宿、评价与筛选等研究， 药学药理的研究－运用色谱分离及色质谱联用 根据1998年的统计：世界分析仪器的销售总额 为110亿美元，仅色谱仪器占了33亿美元约30%。 色谱分析法与其它分析法的最大区别：混合物的快速分离分析。 第一节　色谱法的分类 一、按两相状态分 流动相 气态 液态 GC LC 气相色谱法： 适用于无机气体混合物及低沸点有机混合物的分离分析。 液相色谱法： 适用于高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。 分析对象 二、 按固定相的形式分： 柱色谱 平板色谱 填充柱色谱 (packed column) 空心柱：毛细管色谱(capillary column) 薄层色谱 (TLC) 纸色谱（PC） GC LC SEF 三、 按组份在固定相上的分离机理分类 吸附色谱　　　　吸附作用不同 分配色谱　　　　溶解能力不同 离子交换色谱　　固定相（离子交换剂）上的亲和力不同 凝胶色谱　　　　不同尺寸分子在固定相上的渗透作用， 　　　　　　　 又叫空间（尺寸）排阻色谱 不同组份在固定相上作用机理 分类 四、按色谱使用领域不同、 按组份在固定相上的分离机理分类 分析色谱、制备色谱、流程色谱 迎头色谱法：不适于分离混合物 试样混合物作流动相，吸附（溶解）能力最弱的组分首先一纯物质的状态流出，其次以第一组分和吸附能力较弱的第二组分混合物，以此类推。 五、按色谱动力学 顶替色谱法：用于制备纯物质，缺点：一次性柱子 洗脱色谱法（冲洗法）使用最广泛 首先将样品加到色谱柱头上，然后用吸附或溶解 能力比试样组分弱得多的气体或液体作冲洗剂。 因各组分在固定相上的吸附或溶解能力不同，被冲 洗剂带出的先后次序也不同，从而使组分彼此分离。 A B t 信号 将样品加到色谱柱头，用对固定相的吸附（溶解）能力比分析组分强的物质为流动相，将各组分按吸附或溶解能力的强弱顺序，依次顶替出固定相。 吸附或溶解能力最弱的组分最先流出，最强的最后流出。 t 信号 A A+B t 信号 A B 流出曲线 流出曲线 流出曲线 Time t1 t2 t3 t4 t0 t0 t1 t2 t3 t4 一、混合组分的分离过程。 B组分：与固定相作用强，随流动相流出的速度慢。 A组分：与固定相作用弱，随流动相流出的速度快。 第二节 色谱分离过程及术语 进样 空气峰 色谱图 A B Signal 定性：保留值（t） 定量：峰高（h） 柱效：峰宽峰与峰的距离 Mobile phase Sample 分离过程 A+B A B A B B A B Detector packed column 1、色谱流出曲线和色谱峰 流出曲线：由检测器输出的电信号强度对时间作图所得曲线；色谱峰： 流出曲线上突起部分。 2、基线： 柱后无样品组分流出时的曲线，应该是一条水平直线。 3、峰高（