7第八章遗传和重组解析.pptVIP

RecA引起的链交换和Holliday结构的生成 第二节 位点专一性重组 二、转座子种类 ? 两种类型： 简单转座子（simple transposon） 复合转座子（composite transposon） ? 共同特征： a）两端有20～40bp的相似编码区 b）有编码转座酶基因 1、插入序列（插入序列 insertion sequence IS ） ? 最简单，是细菌染色体、质粒和某些噬菌体的正常组分 ? 命名： IS＋编号（鉴定类型） 长度 700～2000bp ? 特点： a）两端为转座酶的识别位点 b）插入靶位点后会出现靶位点的正向重复（3～9bp） ? IS 可以正反方向插入到DNA（宿主、质粒或某些噬菌体）， 常对插入位点后面的基因表达有所影响。 a) Tn / TnA family l 具有IR、转座酶基因、 调节基因（解离酶） l??????? Tn1 (AmpR) Tn2 (AmpR) Tn3 (AmpR) Tn4 (AmpR StrR) Tn5 (KanR) Tn6 (kanR) Tn7 (StrR TmpR) Tn9 (CamR) Tn10 (TetR) 2.5 kb 20 kb Tn3 IR TnpA Res TnpR AmpR IR 38bp 38bp 转座酶 regulator β- 内酰胺酶 2、复合转座子 ? 两种类型 b）两端重复序列为IS的复合转座子 e.g. IS插入到功能基因两端，可能形成复合转座因子 IS IS IS IS L IS R 臂 中心区 臂 transposition ? 当两个IS组件相同时，其中任一个都可行使转座功能 ? 不同时，主要依靠一个 3 转座噬菌体 Mu phage （巨型转座子 ） C repressor for A, B B 33 kd 与转座有关 A 70 kd 转座酶 U, S 毒性蛋白 attL, attR 与寄主同源，反向重复，转座必需 att L C A B S U att R 150bp 1.5kb G 倒位区 38kb P gin ? 以E.coli为寄主的温和型噬菌体（溶源、裂解） ? Mu的插入途径 a） 侵入的Mu在溶源化过程中任意插入寄主DNA （两侧各5bp的靶位点序列重复） b） 进入裂解生长后，复制产生后代Mu DNA几乎全部插入寄主 DNA中，并可继续转座（形成寄主DNA和Mu的共合体），噬 菌体成熟——切段共合体——包装 三、转座子的转作机制及模式 ? 三种类型：复制型、非复制型和保守型 1、复制型转座模式 ? 实质：转座子元件被复制并被移动到受体位点，最终转座过程 扩增了转座子的拷贝（供、受点） ? 需两种酶： 转作酶（作用于原拷贝两末端） 解离酶（作用于复制后的拷贝） ? 模式： 2、非复制型转座模式 ? 供体上最终产生双链断裂 ? 供体位点如不能被修复则有致 死效应 3、保守型转座模式 ? 另一种非复制型 ? 与λ整合机制相似 其转座酶与λ整合酶家 族有关 四、转座子转座频率的调控 ? 每个转座子控制自身转座的核心----控制转座酶的水平 ? 自发转座频率---10－