6中药质量标准制定的新方法解析.ppt

中药的指纹图谱控制技术 　　一、概述　　二、中药指纹图谱的分类及研究思路　　三、高效液相色谱法制定中药特征指纹图谱的方法与技术要求 　　四、应用示例 决明子HPLC指纹图谱的研究 仪器条件 色谱柱: SunfireTM C18柱(4. 6 mm×150 mm，5μm)；流动相:乙腈-0. 1%磷酸水溶液，梯度洗脱，流速: 0. 8 mL/min，检测波长: 280 nm；柱温：30℃。梯度洗脱条件见表1。 1. 仪器条件 2. 供试品溶液的制备 取决明子药材粉末(20目) 0. 5 g，精密称定，置锥形瓶中，加甲醇 50 mL，称重，回流处理 60 min，放冷，称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，0. 45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 3　方法学考察 3. 1　精密度试验 精密吸取决明子供试品溶液10μL，连续进样5次，测定其RP-HPLC图谱。以芦荟大黄素峰(25号峰)为参照峰，计算各共有峰相对保留时间的RSD值2%，相对峰面积的RSD值3%。表明方法精密度良好。 3.2 稳定性试验 精密吸取决明子供试品溶液，分别于制备后0、3、6、9、12、15、24 h，进样，测得各共有峰相对保留时间的RSD值2%，相对峰面积的RSD值3%，表 明供试品溶液在24 h 稳定。 3.3　重复性试验 取同一批决明子药材5份，2. 2项下方法制备供试品溶液，分别进样，测得各共有峰相对保留间的RSD值2%，相对峰面积的RSD值3%。表明方法重现性良好。 3.4　指纹图谱及各项技术参数 3.4.1 按上述液相色谱条件检测不同产地10批决明子药材的指纹图谱 ，分别将10批决明子药材的指纹图谱输入国家药典委员会开发的《中药指纹图谱相似度评价系统研究版(2004A)》中，进行时间窗的设定、谱峰匹配，最后确定决明子色谱图中含有27个共有色谱峰，见图1、图2。 3.4.2 根据《中药指纹图谱相似度评价系统研究版(试行)》，选择芦荟大黄素峰(25号峰)作为参照峰。各峰相对保留时间、相对峰结果面积，见表2。 4　指纹图谱相似度计算 将10批决明子样品指纹图谱的数据文件导入2004年国家药典委员会开发的《中药指纹图谱相似度评价系统研究版(2004A)》，计算各样品指纹图谱与生成的对照图谱R的相似度，结果见表2。 10 批决明子药材相似度分析结果 样品 S1 S2 S3 S4 S5 相似度 0. 917 0. 960 0. 945 0. 934 0. 950 样品 S6 S7 S8 S9 S10 相似度 0. 967 0. 941 0. 959 0. 910 0. 955 10批决明子药材相似度分析结果 中药指纹图谱建立的原则 ①系统性 指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部所含大 部分成分，或指标性成分的全部 ②特征性 指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较 强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与 优劣，成为中药自身的“化学条码”。 ③稳定性 是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用 程度，以体现其通用性和实用性 陈皮的薄层色谱指纹图谱 银杏提取物的HPLC指纹图谱 △GC-MS法的应用 ——GC-MS测定八角籽挥发油的化学组成 △ GC-MS测定八角籽挥发油的化学组成 △ GC-MS测定八角籽挥发油的化学组成 △ GC-MS测定八角籽挥发油的化学组成 中药质量标准制定的新方法中药的指纹图谱控制技术 一、概述（一）. 问题 双黄连注射液事件 （二）. 中药指纹图谱提出的背景 1. 中药材和中药复方制剂能发挥治疗效 果的物质基础是其化学成分。 2. 无论是中药材，还是复方制剂，从现 代科学观点来看，均是复杂体系。 3. 对于复杂体系必须采用多种高新科技 来表征其不同的特性。 （二）. 中药指纹图谱提出的背景 4. 现行的中药质量标准中列入了显微鉴 别、理化鉴别、含量测定等多种方 法，尚且不足。 5. 国际上目前较通用指纹图谱法。 （三） 中药指纹图谱的定义 中药指纹图谱：是指中药经过适当的处 理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药特性的共有峰的图谱。 (一）.中药指纹图谱按应用对象分类: 1. 中药材(原料药材)指纹图谱。 2. 中药原料药(包括饮片、配伍颗粒)指 纹图谱。 3. 中药制剂指纹图谱。 二. 中药指纹图谱的分类 (二）中药指纹图谱按测定手段分类 1. 中药化学（