饮料中四种糖的含量测定-上海舜宇恒平科学仪器有限公司.pdfVIP

应用报告 LC005 饮料中四种糖的含量测定 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 LC1600 高效液相色谱仪（含 RI-201H 示差折光检测器 1 台，P1600 高压恒流泵 1 台，上海舜宇恒平科学仪器有限公司）；FA2004 电子分析天平（上海舜宇恒平 科学仪器有限公司）；果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品(97%，国药试剂) ； 乙腈(色谱纯，美国 Tedia) ；二次蒸馏水。 1.2 溶液配制 1）糖标准贮备液 分别称取 1g （精确至0.1mg ）的果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖标准品，于 50ml 容量瓶中，加水定容至刻度，得到浓度为 20mg/ml 的上述四种糖的混标标准贮 备液。 2 ）糖标准溶液 分别取标准贮备液 0.50ml、1.00 ml、2.00 ml 、3.00 ml、5.00 ml 于 10ml 容量瓶中， 加水定容至刻度，分别得浓度为 1.0mg/ml、2.0mg/ml 、4.0mg/ml 、6.0mg/ml 、 10.0mg/ml 的混标标准溶液。 3 ）乙酸锌溶液：称取21.9g 乙酸锌，加 3ml 冰乙酸，加水溶解并稀释至 100ml。 4 ）亚铁氰化钾溶液：称取 10.6g 铁氰化钾溶液，加水溶解并稀释至 100ml。 1.3 样品前处理 含有二氧化碳的饮料，参考 GB/T 22221—2008 进样样品前处理。 精密量取除了 CO2 的样品 5ml，移入 10ml 的容量瓶中，缓慢加入乙酸锌和亚铁 氰化钾溶液各 0.5ml，放置室温后，用水定容至刻度，摇匀，静置 30min，用干 燥滤纸过滤，取 2ml 滤液，过 0.45um 微孔滤膜，作为待测样品溶液。 1.4 色谱条件： 色谱柱：Shodex NH2P-50 （4.6 ×250mm ） 流动相：乙腈/水=75/25 流速：1.0ml/min 柱温：30℃ 进样量：5ul 2 实验结果 2.1 精密度实验 将浓度为 4.0mg/ml 的混合标准溶液，在上述HPLC 条件下连续进样 5 次，考察 分析方法在同一浓度水平分析的精密度，结果如下表所示。 表 1. 同一浓度混合标准溶液连续进样5 次的测定结果 No. 果糖 葡萄糖 蔗糖 麦芽糖 Rt/min A Rt/min Rt/min Rt/min A Rt/min A 1 7.394 6716.4 9.586 5828.7 13.505 7405.9 16.44 5590.6 2 7.394 6873.8 9.586 5673.2 13.522 7285.8 16.423 5396.1 3 7.402 6710.15 9.595 5776.5 13.547 7499.7 16.448 5640 4 7.394 6958.4 9.595 5918.4 13.513 7467.2 16.432 5630.7 5 7.327 6675.05 9.47 5659.6 13.388 7169 16.423 5713.8 RSD/% 0.42 1.81 0.57 1.88 0.46 1.45 0.06 2.13 图 1 标准品 HPLC 谱图 2.2 标准曲线 将一系列浓度的标准溶液由低浓度到高浓度进样，以峰面积 (纵坐标 Y 轴)对标 准品浓度 (横坐标 X 轴，mg/ml)进行线性回归，求算标准曲线，结果如下： 表 2 不同浓度混合标准溶液测定结果 浓度/ mg/ml A/果糖 A/葡萄糖 A/蔗糖 A/麦芽糖 1.0 171