紫外分光光度法测定复方磺胺嘧啶片的含量.pptVIP

武汉大学药学实验教学中心 武汉大学药学实验教学中心 实验五 紫外分光光度法测定复方磺胺嘧啶片的含量 ----武汉大学药学院 2014年4月 实验目的 1 实验原理 2 实验方法与指导 3 思考题 5 注意事项 4 主要内容 * 一、实验目的 1.掌握双波长分光光度法的测定原理与方法。 2.掌握片剂含量测定的操作方法和计算方法。 3.了解紫外-可见分光光度法的其它定量方法。 * 一、中心建设简况 （一）比耳-朗伯（Beer-Lambert）定律 二、实验原理 A=-logT=ECL A 为吸光度； T 为透光率； C 为溶液浓度； L 为液层厚度，即吸收池直径（通常为1cm）， E 为吸收系数，即单位浓度、单位液层厚度时的吸光度 在药物定量分析中应用的吸收系数主要是百分吸光系数 值，其物理意义是当溶液浓度为 1%（g/mL），液层厚度为1cm时的吸光度值。 * 四、方法与手段 二、实验原理 吸收系数法 对照品比较法 计算分光光度法 比色法 分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分标示量的100% ±10%，所用溶剂也应完全一致，在规定波长下测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下式计算供试品溶液中待测物的浓度： * 一、中心建设简况 （三）双波长分光光度法消除干扰吸收、测定含量的原理 二、实验原理 式中，a表示被测组分，b表示干扰组分。因干扰组分b在所选波长λ1 、λ2处吸收系数相等，即 ，则即 即 与待测组分浓度成正比，而与干扰组浓度无关。 * 二、实验原理 磺胺嘧啶的测定 SD 和TMP分子结构中均有共轭双键，显紫外吸收特征。 在盐酸溶液（9→1000）中，SD的 λmax = 308 nm，而此波长处TMP无吸收，所以可直接测定SD的含量。 图5-1 TMP和SD的紫外吸收光谱图 TMP（20.0g/ml） SD（40.0g/ml TMP + SD. 溶剂：盐酸溶液 （9 → 1000） （四）复方磺胺嘧啶片中磺胺嘧啶和甲氧苄啶的含量测定原理 * 二、实验原理 甲氧苄啶的测定 图5-1 TMP和SD的紫外吸收光谱图 TMP（20.0g/ml） SD（40.0g/ml TMP + SD. 溶剂：盐酸溶液 （9 → 1000） 如图5-1所示，由于SD对TMP的测定有干扰，所以采用双波长分光光度法测定TMP的含量； SD在277.4nm和308.0nm波长处吸光度相等,而TMP在这两波长处的吸光度差值△A较大，测定供试品溶液在277.4nm和308.0nm波长处的吸光度之差△A，则△A与TMP浓度成正比，与SD浓度无关，从而消除了SD对TMP的干扰。 * 三、实验方法与指导 1.对照品比较法测定复方磺胺嘧啶片中磺胺嘧啶（SD）含量 取本品 (0.4 g SD /片) 10 片，精密称定（求平均片重），研细，精密称取适量（约相当于SD 0.2 g），置 100 ml量瓶中，加 0.4 %氢氧化钠溶液适量，振摇使SD溶解，并用0.4% NaOH稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液 2 ml，置另一100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀，在 308 nm的波长处测定吸光度； 另取SD对照品适量(0.2g)，精密称定，加 0.4 %氢氧化钠溶液使SD溶解，并用0.4% NaOH稀释至100 ml；精密量取该溶液 2 ml，置另一100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，得每 1 ml中约含 40 ?g的溶液，同法测定。 * 三、实验方法与指导 AX和AR——供试品溶液和对照品溶液的吸光度 CR ——对照品溶液浓度 （约40 ?g/ml） W ——称样量，g ——平均片重，g ? 复方磺胺嘧啶片中每片含SD应该为0.360～0.440g * 三、实验方法与指导 2．双波长分光光度法测定复方磺胺嘧啶片中TMP含量 精密称取上述细粉适量（约相当于TMP 40 mg）(50mg TMP /片) ，置 100 ml量瓶中，加冰醋酸 30 ml振摇使TMP溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为 供试品溶液； 另精密称取TMP对照品 40 mg与SD对照品约 0.3 g，分别置 100 ml量瓶中，各加冰醋酸 30 ml溶解，加水稀释至刻度，摇匀，前者作为对照品溶液(1) (TMP)，后者滤过，取续滤液作为对照品溶液(2) (SD)。 * 三、实验方法与指导 精密量取供试品溶液和对照品溶液（1）、（2）各 5 ml，分别置 100 ml量瓶中，各加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀。取对