【全程复习方略】年高考生物实验九DNA的粗提取与鉴定配套新人教版教程.ppt

* 第2讲 实验九 DNA的粗提取与鉴定 1.DNA的提取 （1）DNA和蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同： 2mol/L NaCl溶液 0.14mol/L NaCl溶液 溶解规律 DNA 溶解 _____ 蛋白质 部分发生 盐析沉淀 _____ 在NaCl溶液从2mol/L降低的过 程中，蛋白质溶解度逐渐增大 析出 溶解 （2）__________________，但细胞中的某些物质可以溶于酒精溶液，据此可进一步提纯DNA。 2.DNA的鉴定 DNA+_______ 蓝色。 DNA不溶于酒精溶液 沸水浴 二苯胺 1.鸡的血细胞 鸡的血细胞___________，含有大量的DNA；材料来源容易获得。注意不能选用哺乳动物的血细胞，因为其红细胞高度分化，没有_________，不能从中获得DNA。 2.植物细胞 由于具有细胞壁，不能使用吸水涨破的方法，需进行研磨，使细胞破裂。 含有细胞核 细胞核 选材：选用含有细胞核的_________ 操作：宰杀所选动物收集其血液， 防止凝血，加入的抗凝剂是_________溶液 操作：将血液倒入离心管中离心2 min，除 去上清液 目的：使鸡血细胞快速沉淀，得到__________ 1.制备血 细胞液 取血 离心 鸡血细胞 柠檬酸钠 鸡血细胞液 （1）分别取鸡血细胞液5 mL～ 10 mL和蒸馏水20mL，倒入 烧杯内混合，并用玻璃棒 __________快速搅拌5 min （2）纱布过滤，滤液中含____和其他核物质 2.提取鸡 血细胞的 细胞核物 质 沿一个方向 DNA 3.溶解细胞核内的DNA：向滤液中加入2 mol/L NaCl溶液40 mL, 玻璃棒沿一个方向搅拌1 min 4.析出含DNA的黏稠物：溶液+蒸馏水 析出丝状物 （缓慢加蒸馏水直至黏稠物不再增加为 止），此时NaCl溶液被________________ 5.滤取含DNA的黏稠物 目的：得到含DNA的黏稠物 轻轻搅拌 沿一个方向 稀释到0.14 mol/L 6.将DNA的黏稠物再溶解 操作：用_________过滤 目的：得到含DNA的滤液 7.过滤含有DNA的NaCl溶液 两层纱布 使用的试剂：冷却的、体积分数 为______________ 操作：沿一个方向搅拌，出现乳 白色丝状物，用玻璃棒将 丝状物卷起 目的：得到含杂质较少的DNA丝状物 8.提取含杂质 较少的DNA 95%的酒精溶液 使用试剂：0.015mol/L的NaCl溶液、________ 操作： 现象： 9.DNA的鉴定 二苯胺 不出现蓝色 出现蓝色 二苯胺 1．制备鸡血细胞液时，为什么要倒掉上层血浆？ 提示：去除上层血浆的目的是为了增加DNA的相对含量。 2.实验中出现数次相同操作，其操作的目的分别是什么？ 提示： 操 作 目 的 加蒸馏水2次 （1）加入鸡血细胞液中，使血细胞吸水涨破 （2）加到含DNA的浓NaCl溶液中，使NaCl溶液的浓度降至0.14 mol/L，有利于DNA的析出 用纱布 过滤3次 （1）过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质（滤液） （2）滤取0.14 mol/L NaCl溶液中析出的DNA（黏稠物） （3）过滤含有DNA的NaCl溶液（滤液） 操 作 目 的 涉及到 NaCl溶 液4次 （1）加2 mol/L NaCl溶液，溶解提取的细胞核物质 （2）（加蒸馏水稀释）0.14 mol/L NaCl溶液使DNA析出 （3）加2 mol/L NaCl溶液，溶解滤取的DNA黏稠物 （4）用0.015 mol/L NaCl溶液，用于鉴定DNA 6次搅拌 （1）步骤2中搅拌的目的是加速血细胞破裂 （2）步