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微生物实验技术 第六章 微生物控制技术 * 微生物控制技术 实验6-1 温度对微生物的影响 实验6-2 紫外线对微生物的影响 实验6-3 渗透压对微生物的影响 实验6-4　氢离子浓度对微生物生长的影响 实验6-5 化学药剂对微生物的影响 * 实验6-1 温度对微生物的影响 　　一、实验目的 　　1.了解温度对不同类型微生物生长的影响； 　　2.学习测定微生物最适生长温度的方法。 　　二、实验原理 温度能影响微生物的生长、繁殖和新陈代谢，每种微生物都有它的生长温度范围，每种微生物只能在一定的温度范围内生长，低温微生物最高生长温度不超过20℃，中温微生物的最高生长温度低于45℃，而高温微生物能在45℃以上的温度条件下正常生长。 * 实验6-1 温度对微生物的影响 　　三、实验材料 　　1.菌种 培养24小时的枯草杆菌和大肠杆菌，培养了72小时的黑曲霉或青霉。 　　2.培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂斜面，马铃薯葡萄糖培养基斜面。 　　3.器材 酒精灯，接种针，冰箱，恒温箱。 　　四、实验方法 　　1.接菌　按无菌操作方法进行 　　（1）在5支牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上都接种上枯草杆菌，接种时划直线或曲线。 * 实验6-1 温度对微生物的影响 　　（2）在另5支牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上都接种上大肠杆菌，接种时划直线或曲线。 　　（3）在5支马铃薯葡萄糖培养基斜面上接种曲霉或青霉，接种时用点接法。 　　2.培养与观察 　　（1）培养　将上述接种好的菌种，分别放入0℃、15℃、30℃、37℃、50℃五种温度下培养。 　　（2）观察　48小时后观察，记录实验结果。 　　五、实验报告 记载实验结果，填入表6-1。 * 实验6-1 温度对微生物的影响 表6-1 不同类型微生物在不同温度条件下培养的生长情况 菌种 0℃ 15℃ 30℃ 37℃ 50℃ 枯草杆菌 大肠杆菌 黑曲霉/青霉 注：用“—”表示不生长，“+”表示生长一般，“+ +”表示生长良好。 返回 * 实验6-2 紫外线对微生物的影响 　　一、实验目的 　　1.了解紫外线的杀菌作用原理； 　　2.学习紫外线杀菌试验方法。 　　二、实验原理 紫外线对微生物有强烈的致死作用，波长260nm的紫外线杀菌力最强。其杀菌机制是短波的紫外线引起细胞核酸变性导致微生物死亡。微生物对紫外线的吸收与剂量有关，剂量高低取决于紫外灯的功率、照射距离与照射时间。在本试验中采用15W紫外灯在距灯30cm处通过改变照射时间来处理微生物。紫外线虽有较强的杀菌力，但其穿透力很弱，普通玻璃、薄纸、水层等均能阻止其透过。 * 实验6-2 紫外线对微生物的影响 　　三、实验材料 　　1.菌种 培养24～48h的金黄色葡萄球菌，黏质沙雷氏菌。 　　2.培养基 牛肉膏蛋白胨培养基。 　　3.器材 无菌水，无菌平皿，1mL无菌吸管，玻璃刮铲、灭菌五角星形图案纸(牛皮纸或黑纸)，紫外灯箱。 　　四、实验方法 　　1.制平板 取无菌平皿6套，将已熔化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作法倒入平皿中，使其冷凝成平板。 * 实验6-2 紫外线对微生物的影响 　　2.菌悬液制备 取试管无菌水2支，以无菌操作法分别取金黄色葡萄球菌和黏质沙雷氏菌各2环，接入无菌水中充分摇匀，制成菌悬液。 　　3.接种 将已倒入培养基的平皿分为2组，每组3个，一组接金黄色葡萄球菌，一组接沙雷氏菌，用无菌吸管吸取已制好的菌悬液各0.1mL，分别接种于二组平板上，用无菌玻璃刮铲均匀涂布，随即用无菌镊子夹取无菌图案纸一张，小心放在接种好的平皿中央(图6-1)。 * 实验6-2 紫外线对微生物的影响 图6-1 检查紫外线对微生物生长的影响试验方法 1.图案纸 2.细菌生长圈 3.无菌生长区 * 实验6-2 紫外线对微生物的影响 　　4.分组 将接种的六个平皿分为三组，每组一个金黄色葡萄球菌，一个黏质沙雷氏菌。 　　5.紫外线处理 将紫外灯先开灯预热2～3min。再将上述平皿置于紫外灯下，打开皿盖，在30cm距离处照射。一组照1min，1组照5min，l组照l0min，小心地取下图案纸，盖上皿盖。用黑布或厚纸遮盖，送入培养室内。 　　6.培养 将平皿于28～30℃温度下培养48h。 　　五、实验报告 取出平皿观察分析平板上细菌生长的状况，并绘图表示。 返回 * 实验6-3 渗透压对微生物的影响 　　一、实验目的 　　了解渗透压对微生物生长的影响。 　　二、实验原理 在等渗溶液中，微生物正常生长繁殖