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【学案思考2】 运载体和细胞的膜上的载体相同吗? 不同;①运载体是将外源基因导入受体细胞的专门运输工具,常用的运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体等。②载体是位于细胞膜上的载体蛋白质,与控制物质进出细胞有关系。 (5)微生物常被用做受体细胞的原因是其结构简单、具有繁殖快、代谢快、目的产物多的特点。 * 原理 基因工程是指按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。所以基因工程又称基因拼接技术或DNA重组技术。 基因工程可在不同种生物之间进行(传统的育种方法只能在同种生物中进行),可按照人们的意愿直接定向地改变生物,培育出新品种。 基因工程 工具之一:基因的“剪刀” ——限制酶 基因剪刀指的是限制性核酸内切酶(简称限制酶)。 特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割 DNA分子。 如大肠杆菌中有一种限制酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将其切开。 G A A T T C C T T A A G A A T T C G G C T T A A 限制酶切割的是磷酸和脱氧核糖之间的____________ 磷酸二酯键 工具之二:基因的“针线” ——DNA连接酶 两种来源不同的DNA用同种限制酶切割后,末端可以相互黏合,但这种黏合只能使互补的碱基连接起来,脱氧核苷酸之间的连接,则需要靠DNA连接酶来“缝合”,这种DNA连接酶就称“基因的针线”。 G C T T A A A A T T C G A A T T C G DNA连接酶 DNA连接酶 DNA连接酶连接磷酸和脱氧核糖形成____________ 磷酸二酯键 【学案思考1】 容易混淆的DNA连接酶和DNA聚合酶 (1)DNA连接酶:在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键。 (2)DNA聚合酶:可将单个的脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸序列上,形成磷酸二酯键。 (3)相同点:这两种酶都是蛋白质,可以形成两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。 工具之三:基因的运载体 “基因的运载体”指的是将外源基因送入到受体细胞的一种运输工具。目前常用的运载体有:质粒(存在于细菌、酵母菌等细胞中,是一种能自我复制的很小的环状DNA分子)、噬菌体和动植物病毒。 质粒 DNA 大肠杆菌细胞 抗生素抗性基因 作为运载体的条件 a能在宿主细胞内复制 b有多个限制酶的切割位点,以便于外源基因的连接 C有标记基因,以便进行筛选 基因工程的操作步骤 第一步 提取目的 基因和运载体 第二步 目的基因 与运载体结合 第三步 将目的基 因导入受体细胞 目的基因的检测和鉴定 第四步 细菌 细胞 质粒 DNA 用同种限制酶切断DNA 用连接酶连 接目的基因 将重组DNA 导入受体细胞 增 殖 目的基因的产物 (1)根据受体细胞中是否有标记基因,判断目的基因导入与否 (2)根据受体细胞表现出特定的性状,判断目的基因表达与否 有关基因工程的相关提醒 (1)限制酶在第一步和第二步操作中都用到,且要求同一种限制酶,目的是产生相同的黏性末端;第二步中两种工具酶都用到。 (2)质粒是最常用的运载体,不要把质粒和运载体等同,且不是所有质粒都能作为运载体。 (3)目的基因表达的标志:通过转录翻译合成相应的蛋白质。 (4)通过基因工程培育的抗虫棉,只能抗虫,不能抗病毒、细菌。 四、基因工程的应用 1.基因工程育种 2.基因工程与药物研制 3.基因工程与环境保护 五、转基因生物和转基因食品的安全性 原理:基因重组 方法:转基因技术将目的基因引入生物体内,培育新品种 优点:定向改变生物性状;克服远缘杂交不亲和的障碍 缺点:有可能引起生态危机 产生人胰岛素的大肠杆菌、抗虫棉 有可能引起生态危机 定向改变生物性状;克服远缘杂交不亲和的障碍 转基因技术将目的基因引入生物体内,培育新品种 基因 重组 基因工程育种 无子西瓜、八倍体小黑麦 发育延迟,结实率低 器官巨大,提高产量和营养成分 秋水仙素处理萌发的种子、幼苗 染色体变异 多倍体育种 快速培育矮秆抗锈病小麦 技术复杂且需与杂交配合 可以明显地缩短育种年限 花药离体培养获得单倍体,再经秋水仙素或低温诱导处理 染色体变异 单倍体育种 青霉素高产菌株、太空椒 有利变异少,需大量处理实验材料 可以提高变异的频率,加速育种进程,大幅度地改良某些品种 辐射诱变
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