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概述 1、生物技术 以生命科学为基础,利用生物体系和工程原理生产生物制品和创造新物种的综合性科学技术。(中国农业百科全书) 2、生物技术在育种上的应用优越性 (1)能扩大种质资源的利用范围,创造出 用传统方法难以或不能创造的有重要 经济价值的新品种或新物种。 (2)加快育种进程,克服育种的盲目性,提高 选择准确性和育种效率。 (3)使良种繁育工厂化 (1)已应用到育种的各个环节 并且利用转基因, 花药培养等技术培育出一批植物新品种,许多 植物的良种繁育实现了工厂化 (2)许多理论问题需要进一步研究,许多技术和方 法需要进一步完善 (3)应用前景广阔 生物技术将改变人们的衣食住行,对解决粮 食、环境等问题前景广阔 愈伤组织培养 茎尖培养: 脱毒快繁 幼胚培养: 豆科胚珠培养;禾本科草多用幼胚培养 花药培养: 可用于获得单倍体植株, 组织培养分两步 (1)接种在含2,4-D的诱导培养基上,形成愈伤组织。 (2)转移到去掉2 ,4-D,但加入NAA和细胞分裂素的 分化培养基上,分化出植株。 (一)花药培养技术 是将植物的花药或花粉无菌接种到人工培制的培养基上,诱导出愈伤组织,经过继代和再生,形成单倍体植株的方法。 1953年银杏花粉培养第一次诱导获得愈伤组织 1964年毛叶曼陀螺花粉培养获得单倍体植株 到1988年,已有35科52属160多种植物获得了单倍体植株,其中有20多种植物包括小麦、水稻和大麦等首先在中国获得。 1、花药培养程序 幼穗 花药或花粉 花粉愈伤组织 继代培养和植株再生 试管苗移栽 2、影响花培成功的因素 ★基因型 ★供体植株状态 ★取材时期 ★预处理 ★培养基 ★培养方法 ★培养条件 3、花药培养育种的特点 ★加速育种材料的纯合,缩短育种年限 ★提高了选择效率 ★获得优良基因型的机会小 ★不能用常规方法处理后代材料 ★要求较高的技术 原生质体培养 原生质体—细胞壁分离后,为质膜所包围的裸露植物细胞。由于没有细胞壁的障碍,很容易将外源基因导入原生质体,或进行体细胞杂交、诱变体细胞变异。 (一)原生质体的分离 材料的选择:细嫩部份,细胞分裂旺盛的部位。 酶的选择:纤维素酶、果胶酶, 有时加半纤维素酶。 渗透压稳定剂:等渗的环境,防止胀破。 酶解处理: (二)突变体筛选 1、概述 (1)突变体筛选的由来 组织培养中客观地存在着许多变异 Larkin和Scowcroft(1981)提出了体细胞无性系变异以区分于外植体是配子体来源的离体培养物的再生植株及其后代变异。 不加任何选择压力而筛选出的变异个体称为变异体。 经过施加选择压力所选出的无性系变异,称为突变体。 从离体培养的植物材料中,筛选拟定目标突变体的方法,称为突变体筛选。 (二)突变体筛选 2、突变体筛选的程序 诱变材料的准备 预处理 材料培养 植株再生 突变细胞系的筛选 选择变异体 植株再生 突变体鉴定 方法:一步筛选法和分步筛选法 (二)突变体筛选 3、无性系变异产生的遗传基础 ●染色体畸变 ●可转位基因的激活 ●DNA甲基状态的改变 ●点突变 ●表观遗传变异 epigenetic variation (三)体细胞杂交
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