第八章细胞核与染色体解析.pptVIP

Please be quiet, 上课了！！ 》结构：①核被膜、②核仁、③核骨架、④染色质。》功能：①遗传、②发育。 1　Nuclear Envelope 1.1　核被膜是双层膜结构 核孔运输的特点 1.既有被动运输,又有主动运输 2.核孔运输的双向性 3.核孔运输的信号指导 1.2　Nuclear Pore Complex,NPC 1.2.1　The structural model of NPC 1.2.2　The composition of NPC 1.2.3　The function of NPC 2　Chromatin 2.1　Chemical composition 2.1.1　DNA 2.1.2　Histone 组蛋白的修饰作用 2.1.3　Nonhistone 2.2　Nucleosome 2.2.2　核小体结构要点 2.3　染色体的包装 2.3.1　多级螺旋模型multiple coiling model 2.3.2 骨架-放射环结构模型scaffold radial loop structure model 2.4　Euchromatin Heterochromatin 2.4.2　Heterochromatin （一）DNA分子一级结构具有多样性 1.单一序列； 2.中度重复DNA序列 ； －短散在重复元件（short interspersed elements，SINEs） －长散在重复元件（long interspersed elements，LINEs） 3.高度重复DNA序列 －卫星DNA（satellite DNA），主要分布在染色体着丝粒部位； －小卫星DNA（minisatellite DNA），又称数量可变的的串联重复序列，常用于DNA指纹技术（DNA finger-printing）作个体鉴定； －微卫星DNA（microsatellite DNA）重复单位序列最短，具高度多态性，在遗传上高度保守，为重要的遗传标志。 29 DNA finger-printing作个体鉴定 30 （二）DNA二级结构具有多形性 》①B-DNA、②Z-DNA、③A-DNA。 31 》真核生物染色体的基本结构蛋白，带正电荷(?)，富含Arg，Lys，属碱性蛋白，共5种，分为： 　– 核心组蛋白（core histone）：H2A、H2B、H3、H4； 　– 连接组蛋白（linker histone）：H1。 结构： 》核心组蛋白高度保守，没有种属及组织特异性，尤其是H4。 》 H1是多样性，具有一定的属(genus)和组织特异性。 大多数细胞中都有部分组蛋白的某些碱性氨基酸侧链被磷酸化、乙酰化或甲基化以及ADP的核糖化等修饰 32 33 》非组蛋白具多样性和异质性； 》对DNA具有识别特异性，又称序列特异性DNA结合蛋白 (sequence specific DNA binding proteins)； 》功能：帮助DNA折叠；协助DNA复制；调节基因表达。 非组蛋白在染色体构建中的作用 34 非组蛋白和DNA不同的结合模式 1.α螺旋-转角-α螺旋模式(helix-turn-helix motif) 2.锌指模式(Zinc finger motif) 3.亮氨酸拉链模式(Leucine zipper motif，ZIP) 4.螺旋-环-螺旋结构模式(helix-loop-helix motif，HLH) 5.HMG-盒结构模式（HMG-box motif）： 35 》多以α-helix和DNA大沟识别并结合，进而影响复制和转录。 36 》染色质的基本结构单位—核小体(nucleosome)。 37 2.2.1　Main experimental proof 1.铺展染色质的电镜观察 38 2.用非特异性微球菌核酸酶消化染色质，部分酶解片段分析结果. 39 3.应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术研究. 》核小体颗粒是直径为11nm、高6.0nm的扁园柱体，具有二分对称性。核心组蛋白的构成是先形成(H3)2.(H4)2四聚体，然后再与两个H2A﹒H2B异二聚体结合形成八聚体 图　X-射线晶体衍射(2.8A)所揭示的核小体三维结构 40 1.每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体核心(Core)及一个分子H1； 2.由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒； 3.146bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈, 组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bp DNA，锁住核小体DNA的进出端，起稳定核小体的作用； 4.两个相邻核小体之间以连接DNA 相连，典型长度60bp，不同物种变化值为