《微生物学》第四章微生物的生长与环境条件分析.pptVIP

* 用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增多而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 * * 对酵母菌可同时测定出芽率，或在菌悬液 中加入少量美蓝可以区分死活细胞。用美蓝对酵母细胞染色一定时间后,无色的为活细胞,蓝色的为死细胞. * * * * * * 培养基成分 接种到同样组成的培养基比接种到组成不同的培养基中，其延迟期要短些； 应用（意义）：由于延迟期的长短能影响微生物的正常生长周期，在发酵工业生产中延长生产周期，会降低设备的利用率，所以在生产实践中总是设法缩短延迟期。 采取的缩短lag phase 的措施有： ①增加接种量； （群体优势----适应性增强） ②采用对数生长期的健壮菌种； ③调整培养基的成分，在种子基中加入发酵培养基的某些成分。 ④选用繁殖快的菌种 * 认识延迟期的特点及形成原因对实践的指导意义： 由于延迟期的长短能影响微生物的正常生长周期，在发酵工业生产中延长生产周期，会降低设备的利用率，所以在生产实践中总是设法缩短延迟期。 发酵工业上需尽量缩短该期，以降低生产成本 在食品工业上，尽量在此期进行消毒或灭菌 * 对数期（logarithmic phase） 应用意义 （１）是代谢生理研究的良好材料 （２）增殖噬菌体的最适宿主菌龄，生产中接种的最佳种龄 由于此时期的菌种比较健壮，生产上常用该时期的菌体作为菌种。另外，实验室常用对数期的菌种作为实验材料研究微生物的代谢、遗传研究或进行染色、形态观察等。 * * * * * 根据微生物的最适生长温度的不同，可将微生物划为三个类型： * * * 各类菌所含对氧解毒酶 专性好氧菌 SOD，过氧化氢酶 兼性厌氧菌 SOD， 过氧化氢酶 专性厌氧菌 二种酶均无 微好氧菌 少量SOD 耐氧菌 SOD， 过氧化物酶 （二）O2·驱除机制： 1、SOD（超氧化物歧化酶）的作用； 2、过氧化氢酶的作用—好氧菌； 过氧化物酶的作用—耐氧菌； O2· + 2H+ H2O2 H2O +（1/2O2） 紫外线对细菌有强大的杀伤力，对人体同样有一定的伤害，人体最易受伤的部位是眼睛之眼角膜，因此在任何时候都不可用眼睛直视点亮着的灯管，以免受伤，万一必须要看时，应用普通玻璃(戴眼镜)或透光塑胶片，作为防护面罩。千万勿错用石英玻璃，因为普通玻璃对紫外线几乎完全无法透过的。一旦受伤，不必惊慌，面部灼伤，几天后表皮脱落，不治而愈。眼睛受伤会红肿、流泪、刺痛，约三、四天才能痊愈。不论如何，一遇到伤害，仍然建议立即就医求诊 * 灼烧法（incineration）：将被灭菌物品在火焰中灼烧，使所有的生物质碳化。适用于不怕烧的实验器具，如接种环、镊子、试管或三角瓶口的灭菌等。 ★ 湿热法(moist heat sterilization) ： 特点：温度低、时间短、灭菌效果高 原因： 1) 菌体内含水量越高，则凝固温度越低； 2) 蒸汽冷凝会放出潜热； 3) 饱和水蒸汽穿透力强； 4) 易破坏细胞内蛋白质大分子的稳定性，如氢键结构。 湿热灭菌 湿热比干热灭菌更好： 湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件： 多数细菌和真菌的营养细胞：在60℃左右处理5-10min； 酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上温度处理； 细菌的芽孢：121℃处理15min以上； 1)有水，蛋白质易凝固 2)热蒸汽的穿透力强 3)蒸汽有潜热存在 高压蒸汽灭菌法：利用水的沸点随水蒸气压力的增加而上升，以达到100 ℃以上高温灭菌的方法。 方法：121℃（1kg/cm2或15磅/英寸2）维持15~20min。 112℃（0.5kg/cm2或8磅/英寸2）20~30min。 115℃（0.75kg/cm2或11磅/英寸2）20~30min。 应根据灭菌物品的性质或成分选择灭菌温度 例如：生理盐水、营养琼脂等培养基用121 ℃。 含葡萄糖、乳糖、氨基酸等培养基用112 ℃。 适用：耐高温物品，玻璃仪器、含水或不含水的物品。 高 压 蒸 汽 灭 菌 锅 注意事项： 排净冷空气； 灭菌终了，缓慢降压； 灭菌结束，趁热取出物品。 煮沸消毒法 将水加热至100℃，煮沸15min~30min，可杀死